MicroRNA-188靶向JNK/p38凋亡信号通路调控对比剂诱导的急性肾损伤机制研究

Contrast-induced acute kidney injury (CI-AKI) is the third-leading cause of hospital-acquired acute kidney injury with poor long-term prognosis. Contrast medium-induced tubular renal cells apoptosis via MAPK-JNK/p38-apoptosis signaling pathway represents a key mechanism of CI-AKI. Our preliminary study revealed that renal-specific microRNA-188-5p (miR-188) is consistently upregulated during the early stage of CI-AKI and could be served as potential biomarker to early detect CI-AKI. Bioinformatics analysis implicated that miR-188 might be a key modulator of JNK/p38 signaling pathway via targeting variety of upstream activators. In present study, we would further reveal the dynamic expression pattern of miR-188 in CI-AKI, elucidate the relationship between miR-188 and contrast medium-induced JNK/p38-apoptosis pathway and the underlying mechanisms, and provide new therapeutic targets for CI-AKI.

对比剂诱导的急性肾损伤（CI-AKI）是医源性急性肾功能衰竭的第三位病因，与患者远期预后不良密切相关。MAPK-JNK/p38凋亡信号通路介导的肾实质细胞凋亡是CI-AKI的关键病理机制。我们前期研究发现，肾脏特异表达的microRNA-188-5p（miR-188）在CI-AKI发病早期血浆中稳定上升，是良好的疾病早期诊断标记物。综合多种生物信息学方法功能预测提示，miR-188调控多种JNK/p38上游基因，可能是肾实质细胞凋亡的关键调控因子。本项目拟从在体和离体两方面系统观察对比剂诱导急性肾损伤过程中，miR-188的表达变化规律，明确其与肾小管上皮细胞凋亡及相关信号通路激活的关系，阐明miR-188调控JNK/p38凋亡通路的具体分子机制，以期证实miR-188是对比剂诱导肾急性损伤过程中的重要保护性因子，为寻找新的CI-AKI干预治疗靶点提供实验和理论依据。

对比剂诱导急性肾损伤是冠脉介入术后第三大并发症，与患者预后密切相关。本项目针对对比剂诱导急性肾损伤进行三方面科学研究。（1）对比剂诱导急性肾损伤临床诊断标准探讨：回顾性分析2013年7月至2014年12月于上海交通大学医学院附属仁济医院心脏中心行冠状动脉造影术(CAG)或经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的患者共1063例。分别采用欧洲泌尿生殖放射学会对比剂肾病(CIN)诊断标准和改善全球肾病预后组织(KDIGO)诊断标准对冠状动脉介入术后对比剂诱发急性肾损伤(CI-AKI)的患者进行诊断。主要结论：采用KDIGO诊断标准和CIN诊断标准，诊断PCI术后CI—AKI发病率存在明显差异。相较于CIN标准，KDIGO标准可能与行PCI患者的临床高危特征以及术后MAEs有着更为显著的相关性。KIDGO标准优于CIN标准。（2）对比剂诱导急性肾损伤危险分层研究：前瞻性纳入2013年7月至2014年12月期间于仁济医院心脏中心行CAG或PCI术，采集完整血液标本的患者，共1071例。入组患者分别于术前及术后24至48小时之间采集血液标本，定量检测血肌酐（SCr）及血胱抑素C（CyC）水平。CI-AKI的SCr诊断标准采用KDIGO标准。对所有入组患者进行术后一年随访。结论：以CysC和SCr为标准联合诊断CI-AKI，CI-AKI低危组患者术后一年MAEs的OR值为2.38，CI-AKI 高危组患者术后一年MAEs事件的OR值达16.56，能够更好地预测CI-AKI患者长期MAEs的发生风险，便于对患者进行危险分层，具有相当的临床指导意义。（3）他汀干预对比剂诱导急性肾损伤研究：雄性SD大鼠进行CI-AKI造模。不同他汀给药组自禁水第1天起每天灌胃给药，共4天；空白对照和造模对照组给予等量溶剂。对比剂注射24小时后经大鼠颈静脉采集血液样本，经心脏体循环灌注后留取肾脏。研究结果：与CI-AKI组相比，阿托伐他汀及瑞舒伐他汀治疗可使SCr水平降低，大鼠的组织病理学改变减小。相比之下，辛伐他汀治疗并没有显著降低CI-AKI大鼠的SCr水平，组织病理学改变。瑞舒伐他汀和阿托伐他汀治疗组TUNEL阳性细胞数量分别减少了20%（<0.05）和37%（<0.01），而辛伐他汀治疗组则没有效果。