HMGB2经RAGE介导促进糖尿病动脉粥样硬化机制的研究

炎症因子/终末糖化产物（AGEs）-AGEs受体（RAGE）途径是糖尿病动脉粥样硬化发病的重要机制。为挖掘与RAGE结合的新炎症因子并阐明致病机制，我们制作了心肌缺血再灌注大鼠模型，行再灌组织体外培养。培养液中，以sRAGE-RAGE抗体-proteins G beads 免疫沉淀和质谱技术发现了HMGB2等新因子，较对照显著升高。HMGB2能与RAGE结合，促炎症和氧化应激，上调黏附分子表达，诱导吞脂，糖尿病冠心病患者血清中和糖尿病动脉粥样硬化模型血管壁内HMGB2水平明显升高。后续研究①在apoEKO/DM和apoEKO/DM RAGE-/-及相应非糖尿病小鼠，给予HMGB1/HMGB2或对照，以明确HMGB2是否经RAGE介导发病；②研究内皮/巨噬细胞在高/低糖时HMGB2 致病信号通路；③比较HMGB1和HMGB2的致病差异。阐明HMGB2经RAGE介导促进糖尿病动脉粥样硬化机制。

糖尿病时冠状动脉粥样硬化发生发展比非糖尿病时更迅猛，预后更差。在糖尿病动脉粥样硬化发生病理生理中，终末糖化产物受体（RAGE）起着至关重要的作用，我们运用蛋白组学技术在动脉粥样硬化组织中寻找RAGE的关键配体，在含不稳定斑块的动脉粥样硬化组织和对照组织中，发现并验证了前者HMGB2等RAGE配体水平显著高于后者。之后，运用患者生物样本、分子生物学、细胞生物学、体外体内功能实验、apoE-/-动脉粥样硬化模型探讨HMGB2对动脉粥样硬化和糖尿病动脉粥样硬化发生发展的作用。发现：严重动脉粥样硬化冠状动脉剥脱内幕组织和外周血单个核细胞中HMGB2表达比健康对照显著升高。在内皮细胞HUVECs和巨噬细胞THP-1中，HMGB2能够剂量依赖性促进粘附分子和炎症因子表达；增强单核巨噬细胞-内皮细胞粘附；促进巨噬细胞吞脂。HMGB2促进体内（腹腔单核巨噬细胞趋化）和体外（Boyden chamber transwell实验）单核巨噬细胞趋化迁移；但在RAGE敲除小鼠中HMGB2诱导的体内和体外趋化迁移作用明显被抑制。在apoE-/-和糖尿病apoE-/-腹腔中注射HMGB2（隔日10g）并高脂喂养。6个月后发现HMGB2显著促进动脉粥样硬化发生，糖尿病小鼠中效应又比非糖尿病小鼠明显。这些结果显示HMGB2作为RAGE的重要新配体，对动脉粥样硬化，尤其是糖尿病动脉粥样硬化的发生发展起着重要的促进作用。同时，这些均为原创性工作。本研究工作已经完成，投寄SCI文章1篇，发表相关SCI论文2篇，接受1篇。本研究项目的实施增强了上海交通大学医学院附属瑞金医院心血管疾病研究的综合实力。相关研究内容参与获得国家科技进步奖二等奖（排名第2）。