FLG突变对中间丝相关蛋白表达和皮肤屏障功能的影响

In 2006, loss-of-function mutations in the filaggrin gene were demonstrated to be associated with atopic dermatitis for the first time. Subsequently multiple studies have been done in various populations mainly on the structure of FLG gene and its relationship with atopic dermatitis, however, rarely covering the relationship of the expression of filaggrin caused by various mutation sites in the FLG gene and epithelial barrier function.We previously carried out a comprehensive sequencing of the entire FLG coding region in 600 Han AD patients and confirmed the relationship of FLG mutations with atopic dermatitis. Over 45 types of FLG mutations have been identified including 17 new FLG mutations discovered in our study. The effect of various FLG mutations on the expression of filaggrin and epithelial barrier function remains unclear. The current study is focused on the effect of different FLG mutations on the expression of filaggrin and epithelial barrier fuction from oganic levels: Stable expression of filaggrin with site-directed mutagenesis followed by FLG-mutant composition in keritinocytes by gene-cloning technique is to be constructed. Organotypic skin cultures, which have been maturely implemented in skin-grafting area, will be performed on FLG-mutant imitating epidermis differentiation in vivo.

2006年，研究发现中间丝相关蛋白基因（FLG）无义突变与特应性皮炎（AD）相关；此后，多个研究小组在不同人群对FLG的结构特征及其突变与AD发病的关系进行了大量的研究；但这些研究没有涉及突变位点的不同与基因表达产物和皮肤屏障功能的关系。前期研究中我们通过对中国人群AD进行FLG全基因测序，明确FLG突变与中国人群AD发病强相关，并且首次发现了17个新突变，将文献报道的FLG突变数目增加到45种以上。那么不同突变位点对中间丝相关蛋白的表达和皮肤屏障功能的影响是否不同？本研究的目的拟利用基因克隆技术，构建角质形成细胞FLG突变株，使定点突变在角质形成细胞上稳定表达；而后利用已成熟应用于皮肤移植领域的器官特征性皮肤培养使突变细胞株模拟人体表皮各层分化结构，从器官水平研究FLG突变对中间丝相关蛋白表达和皮肤屏障功能的影响。

特应性皮炎（AD）是一种常见的慢性复发性炎症性皮肤病，累及约10-20%的儿童和3-5%的成人。AD发病的关键机制之一是皮肤屏障功能破坏，而中间丝相关蛋白基因（FLG）突变是皮肤屏障功能破坏的主要原因。前期研究中我们通过对中国人群AD进行FLG全基因测序，明确FLG突变与中国人群AD发病强相关，并且首次发现了17个新突变，将文献报道的FLG突变数目增加到45种以上。那么不同突变位点对中间丝相关蛋白的表达和皮肤屏障功能的影响是否不同？是否携带突变对AD的预后有何影响？此外，近年来有报道FLG单核苷酸多态性（SNP）可能和功能缺失突变一样导致机体对AD易感。重度AD的治疗是一个世界性难题，目前主要依赖系统性糖皮质激素和免疫抑制剂治疗，其毒副作用大，且激素治疗存在“反跳”现象。一些中药作为辅助治疗AD的一类药物由来已久，而其作用机制尚不明确。.本研究针对上述问题开展研究：1、研究穿心莲内酯（ANDRO）对佛波酯和钙离子载体（PMACI）激活的肥大细胞（HMC-1）中胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）表达水平的影响及其相关分子机制；口服及外用穿心莲内酯对小鼠AD模型的临床疗效，以及对皮肤中炎症细胞浸润程度及TSLP表达水平的影响。2、研究在中国汉族人群中早年发病的AD患者的自然病程及预后影响因素。3、研究中国汉族AD人群中FLG基因多态性与AD的关系。.本项目共发表标注本项目的SCI论文共1篇（已定稿）。研究成果曾在国内学术会议上专题报告。.