松弛素/内皮素-1平衡漂移对系统性硬皮病纤维化的作用及其机制研究

系统性硬皮病（SSc）患者成纤维细胞合成胶原异常增多导致皮肤和内脏纤维化是其发病的主要因素。我们前期研究观察到SSc成纤维细胞胶原过表达很可能继发于细胞外微环境物质的作用。内皮素-1（ET-1）和松弛素分别为SSc患者体内促进、抑制纤维化的重要内源性激素，但两者潜在的相互作用及其平衡漂移对SSc纤维化的调控作用及其机制尚不清楚。该课题拟先检测SSc活动期患者和正常对照者血清ET-1和松弛素水平，了解松弛素/ET-1漂移与SSc患者纤维化程度的关系。再以SSc胶原合成异质性成纤维细胞克隆为靶细胞，以细胞增殖、I型/III型胶原合成与降解系统的变化及胶原启动子活性等为主要指标，在体外观察松弛素/ET-1平衡与失衡对成纤维细胞胶原表达的不同调节作用。最后应用SSc小鼠模型在体内验证纠正两者的失衡对SSc纤维化的缓解作用。以探寻SSc纤维化发生的新机制和防治的新策略。

系统性硬皮病（SSc）患者成纤维细胞合成胶原异常增多导致皮肤和内脏纤维化是其主要特征。内源性激素的平衡失调可能是SSc的重要病因之一，内皮素-1和松弛素分别为SSc患者体内促进、抑制纤维化的重要内源性激素，但两者潜在的相互作用及其平衡漂移对SSc纤维化的调控作用及其机制尚不清楚。该课题系统探讨了内皮素-1和松弛素平衡漂移对SSc纤维化的作用及其机制。观察到SSc患者血清内皮素-1、松弛素和松弛素/内皮素-1比值显著高于健康对照者，提示血清松弛素可能是较内皮素-1更好的SSc患病标志物，它可能反映SSc患者体内对纤维化的防御反应。SSc男性血清松弛素和松弛素/内皮素-1比值增高以及SSc育龄女性血清内皮素-1增高与内脏损害相关。在体外实验中观察到松弛素（1-100μg/L）以剂量依赖的方式拮抗内皮素-1（0.25mg/L）对SSc和正常人皮肤成纤维细胞克隆的促增殖作用，同时降低内皮素-1上调的I型和III型胶原mRNA表达，并升高内皮素-1下调的基质金属蛋白酶(MMP)-1/其组织抑制剂 (TIMP)-1 mRNA表达。在体内实验观察到，博来霉素诱导的硬皮病小鼠在早期（1-3周）血浆内皮素-1水平以及皮肤和肺内皮素-1与COL1A1的mRNA表达显著升高。松弛素能降低硬皮病小鼠的真皮厚度和肺纤维化程度，同时下调硬皮病小鼠血浆内皮素-1水平以及皮肤和肺内皮素-1与COL1A1的mRNA表达，该效应在早期（1-3周）更显著。以上结果提示拮抗与下调内皮素-1可能是松弛素抗纤维化的重要途径之一，这有助于深入理解内源性激素及其相互作用在SSc发病机制中的作用，并提示新的防治策略。