低温造成心肌线粒体呼吸链电子漏诱导HIF-1的实验研究

减轻低温损害，延长器官冷保存时限，可望缓解移植供体短缺。长时间低温对心肌线粒体呼吸链损伤机制尚未明确。我们已用EPR研究了NO抑制线粒体呼吸链引起电子漏产生ROS导致缺血再灌注心肌的损伤。将进一步在非缺氧条件下研究低温损伤线粒体的机制及其意义。我们推测低温可能影响呼吸链电子有效传递造成旁路电子漏增多，生成ROS进而诱导HIF-1；HIF-1是机体对抗损伤，实现自我修复的关键核转录因子。主动上调HIF-1可能保护线粒体，缓解低温损伤。本课题将从离体细胞、离体器官、在体试验三个层面研究低温时心肌线粒体呼吸链电子漏、ROS、和HIF-1的关系；拟用RNA干扰技术，抑制HIF-1降解酶PHD-2和FIH-1，观察上调HIF-1能否反馈性减少ROS，抑制细胞凋亡。探讨用增加离体心脏HIF-1的方法实现对低温保存器官更长时间有效保护。