中药小复方“松友饮”通过调节分化抑制因子Id而抑制化疗后肝癌干细胞特性的改变

The effect of current option to treat hepatocellular carcinoma (HCC) is limited due to fail to eliminate resistant tumor cell with tumor stem cell characteristics (stemness). Therefore, targeting to tumor stem cell is a reasonable option. Previous studies showed after blockage of tumor blood supply or chemotherapy the residual tumor cell acquired more aggressive behavior such increasing metastasis potential and epithelial-mesenchymal transition (EMT). We also fund Chinese medicine "song you yin" could reverse the EMT of residual tumor in HCC after treatment with chemotherapeutic agent oxaliplatin. Further results showed that "song you yin" eliminate the CD90+ /EPCAM+ subtype HCC cells and this effect had close relation to inhibiting over expression of Inhibitor of Differentiation/DNA Binding (Id). Based on the previous results we will clarify the role of Ids signal pathway in chemotherapy induced HCC stemness changes and reveal the mechanisms underlying the "song you yin" inhibition of stemness of HCC after chemotherapeutic agents treatment. We hope this research will provide the theoretic support for Chinese medicine targeting to HCC stem cell and taking the important role in the integrated therapy for HCC.

对现有常用治疗方法耐药的、具有干细胞特性（stemness）的肝癌细胞是导致治疗的失败主要根源，针对具有干细胞特性的肝癌细胞是具有理想前景的治疗策略。本课题前期的研究发现，阻断肝癌血供或化疗可引起残余肝癌细胞转移特性的提高，诱发肝癌细胞发生上皮-间质转化（EMT）。而应用中药小复方"松友饮"可抑制化疗后肝癌细胞发生EMT，并抑制肝癌细胞的干细胞特性，如干细胞标志CD90/EPCAM阳性细胞减少，并发现其抑制肝癌干细胞特性同时抑制分化抑制因子Ids的表达有关。本课题拟在前期研究的基础上，通过体外化疗诱导模型和体内化疗诱导模型，明确化疗诱导后Ids信号途径调控肝癌干细胞特性的作用机理；并进一步研究"松友饮"对Ids信号途径调节作用，明确"松友饮"抑制化疗诱导的肝癌干细胞特性改变的机制。为中药小复方"松友饮"以肝癌干细胞为靶点，联合目前常用肝癌治疗方法，提高肝癌治疗效果提供理论支持。

前期的研究结果显示中药小复方"松友饮"可抑制化疗后肝癌细胞发生EMT，并抑制肝癌细胞的干细胞特性，如干细胞标志CD90/EPCAM 阳性细胞减少，并发现其抑制肝癌干细胞特性同时抑制分化抑制因子Ids 的表达有关。本课题的目标是研究ID1调节化疗耐药的肝癌细胞系“干性”，导致肝癌细胞耐药的分子机制。本课题在高通量基因分析及生物信息学分析的基础上，在建立的奥沙利铂耐药细胞的模型上，针对ID1调控的信号转导，通过体外、体内研究，探索了ID1调控肝癌化疗耐药的分子机制，获得以下结果：.1).针对已经建立奥沙利铂耐药的细胞系和裸鼠移植肝癌模型，通过高通量的基因组学、长链非编码RNA芯片差异表达谱，结合生物信息学分析，确定了潜在的信号转导途径。.2).ID1可通过诱导Aurora Kinase A（AURKA）表达，进而调节肝癌细胞“干性”和耐药。.3).ID1能够调节糖代谢中的磷酸戊糖旁路的关键酶6-磷酸葡萄糖激酶（G6PD）过表达，激活磷酸戊糖旁路，影响还原型辅酶Ⅱ（NADPH）/活性氧（ROX）的平衡造成对奥沙利铂的抗药性。 .4).明确了奥沙利铂耐药细胞系及移植模型的ID1的过表达受到结缔组织生长因子CNN家族成员CNN2调节，后者通过MAPK通路影响ID1的表达，进而影响肝癌细胞的干性。.本课题按计划完成了研究内容，实现了预期的研究结果。明确了中药小复方“松友饮”调节ID1而抑制肝癌细胞“干性”，提高奥沙利铂耐药的分子机制，为中药小复方"松友饮"在肝癌综合治疗的中的应用，提高肝癌治疗效果提供理论依据。