α-MSH调控Th17/Treg平衡在黑素细胞免疫耐受中的作用研究

白癜风是黑素细胞缺失引起的色素障碍性皮肤病，导致黑素细胞缺失的机制尚不明确，限制了临床治疗进展。生理状态下黑素细胞处于免疫耐受状态。我们前期研究发现白癜风患者黑素细胞存在免疫活化现象，免疫耐受被打破而参与了白癜风发病。结合其他学者研究发现，在皮肤黑素生成中具重要作用的α-MSH对树突状细胞等具有免疫调节作用。我们推测：Th17/Treg失衡参与了白癜风发病，α-MSH通过调控Th17/Treg平衡维持黑素细胞免疫耐受，防止白癜风发生。本研究拟体外诱导白癜风患者Th17/Treg细胞分化，并观察α-MSH对Th17/Treg细胞的调控作用；其次，观察IL-17对黑素细胞CD40、HLA-DR等免疫活化分子的表达影响；最后将免疫活化的黑素细胞与白癜风患者淋巴细胞混合培养，观察黑素细胞的免疫破坏机制。本研究可望从新的免疫学角度研究黑素细胞缺失机制，并为α-MSH用于临床治疗白癜风提供免疫学依据。

白癜风是一种常见色素脱失性皮肤病，病因复杂，治疗困难。其中自身免疫导致黑素细胞破坏缺失在白癜风发病中具有重要作用，但导致黑素细胞破坏的自身免疫机制目前仍未阐明。本研究即通过观察稳定期与进展期白癜风患者白斑与非白斑处IL-17，TGF-β以及α-MSH的表达变化，探讨白癜风移植治疗失败的可能原因。进一步探讨黑素细胞表面CD40、CD86、HLA-DR表达与黑素细胞免疫活化的关系。并观察白癜风患者淋巴细胞与免疫活化黑素细胞的相互作用，阐明自身免疫反应破坏黑素细胞的机理及α-MSH的保护作用。.研究结果发现：（1）进展期白癜风患者血清中IL-17水平显著高于正常对照组和稳定期患者，IL-17随着白癜风白斑面积增大其水平逐渐升高；而TGF-β水平在进展期白癜风患者血清中也是高于正常对照组和稳定期患者，但无统计学意义。表明：血清中IL-17和TGF-β水平与白癜风病情有一定的关系，尤其是IL-17可能在白癜风发病中发挥重要作用。（2）稳定期白癜风患者中，寻常型白癜风局部白斑与非白斑处皮肤疱液比较α-MSH水平显著下降，差异有显著性，IL-17，TGF-β水平均增高，但无显著统计学差异。表明：稳定期白癜风患者局部白斑皮肤微环境仍处于免疫异常状态，移植治疗的失败可能与α-MSH分泌减少引起局部微环境异常有关。（3）随着IL-17浓度增加，黑素细胞表面CD40、CD86、HLA-DR表达均显著增加。1nM α-MSH预处理培养的黑素细胞，其表达均显著下降。ASIP-YY阻断α-MSH作用，CD40、CD86、HLA-DR表达又上调恢复。表明IL-17可以免疫活化黑素细胞，而α-MSH通过与受体结合对黑素细胞发挥免疫保护作用。（4）CTL与黑素细胞共培养后，黑素细胞凋亡及LDH释放率显著增加，与对照组比较差异有显著性。1nM 的α-MSH处理后，黑素细胞凋亡及LDH释放率显著下降，与共培养组比较差异有显著性。共培养组颗粒酶B及穿孔素蛋白表达显著增加，与对照组相比差异有显著性。1nM的α-MSH预处理后，颗粒酶B及穿孔素的蛋白表达显著下降；与共培养组比较差异有显著性。.通过本研究证实，IL-17可以活化黑素细胞，打破其免疫耐受状态，CD8+T细胞可以破坏免疫活化的黑素细胞，而α-MSH可以发挥保护黑素细胞免疫耐受的作用，其作用的发挥是通过与其受体MC1R结合进行的。