五味子藤茎治疗老年痴呆的药效物质基础及作用机理研究

Based on the determination of effective parts and major biological constituents of Fructus schisandrae rattan (FSR) against alzheimer's disease (AD), effective parts have been isolated and purified to produce constituents of phenyl propanoids and terpenoids, whose structures were determined by chemical and spectrum methods. Meanwhile, the pharmacodynamics research could help determine the pharmacological active constituents of FSR against AD. A pharmacological evaluation system will be established by combination of the primary cell and single cell models induced by Aβ and animal model induced by Aβ. This evaluation system can be further used for investigations of effective parts, effective fractions and effective constituents for the influence of expression of cytokines, which are closely associated with AD pathology process by neural nutrition, oxidative stress, and inflammatory reaction. In this case, it will be of significant for a further discussion on correlations between effective parts, effective fractions and effective constituents and pharmacological action and mechanism. Ultimately, it is possible to clarify pharmacodynamic material basis and action mechanism of FSR against AD. This study can provide a eutherapeutic new drug for the treatment of AD with independent intellectual property rights. Furthermore, this research provided the important scientific basis to make the best of rich natural plant resources of FSR.

在已确定五味子藤茎治疗老年痴呆有效部位及其主要生物活性的基础上，对有效部位拆分得到的苯丙素类组分和萜类组分进行系统的化学成分分离，采用波谱学测试技术鉴定单体化合物的化学结构，并通过药效学研究确定五味子藤茎治疗老年痴呆的有效组分和有效成分。结合Aβ诱导的原代细胞共培养模型、原代单细胞模型和Aβ致痴呆动物模型，综合构建治疗老年痴呆药物的多维药理学评价体系，考察有效部位、有效组分、有效成分三个化学层次的药效物质基础对神经营养、氧化应激、炎症反应及凋亡等与老年痴呆病理过程密切相关的细胞因子及其表达的影响，探讨有效部位、组分和成分与药理作用和作用机理的相关性，阐明五味子藤茎治疗老年痴呆的各层次药效物质基础及作用机理。本研究可为研制出疗效好、具有自主知识产权的治疗老年痴呆新药，充分利用五味子藤茎丰富的天然植物资源提供重要的科学依据。

本项目阐明了五味子藤茎治疗阿尔兹海默病（AD）有效部位、有效组分和有效成分三个化学层次的药效物质基础，并结合体内、体外药效学研究深入探讨了五味子藤茎治疗AD的作用机制。.构建了五味子藤茎治疗AD有效部位、有效组分和有效成分三个化学层次的药效物质基础体系，将五味子藤茎治疗AD的有效部位拆分得到苯丙素类和萜类两个有效组分，且验证二者互不交叉性良好；在阐明五味子藤茎治疗AD有效组分的化学特征的基础上，分离鉴定出86个化合物，包括41种苯丙素和29种单萜类化合物(新化合物34个)并探讨其构效关系，部分木脂素类化合物和单萜苷类化合物提高神经细胞存活率，木脂素类化合物的活性强于单萜苷类化合物，木脂素类化合物中联苯环辛烯结构化合物对细胞活性明显增强；明确了五味子藤茎治疗AD的各层次药效物质基础及其作用机制，采用大鼠双侧海马CA1区注射Aβ1-42建立AD大鼠模型和Aβ诱导的“神经元细胞-小胶质细胞”共培养和“神经元细胞-星形胶质细胞”共培养细胞模型，结合H＆E染色、ELISA、免疫组化、MTT、RT-qPCR和Western Blot等方法，开展体内体外药效学和作用机制研究。研究结果表明五味子藤茎各层次药效物质基础是通过减轻氧化应激的损伤，提高脑内细胞的抗氧化能力，调节脑内的氧化平衡，促进脑内神经细胞的活性，加快神经系统损伤后的修复等机制而发挥治疗AD作用的。.此外，为了完善项目研究的完整性、延伸项目研究深度，开展了五味子藤茎中苯环辛烯型木脂素的含量测定研究，五味子藤茎提取物对AD模型大鼠的血清生物标记物及代谢通路研究，木脂素组分中的6种木脂素类成分在大鼠体内的药物代动力学研究以及五味子果梗的化学成分研究。.本项目研究深化了对五味子非药用部位的科学认识，并可为研制出疗效好、具有自主知识产权的治疗AD新药，充分利用五味子藤茎丰富的天然植物资源提供重要的科学依据。此外，将细胞生物学中的“共培养”策略，用于中药作用机理的研究，可为其他AD治疗药物作用机理的研究提供新思路、新模式。