苦瓜叶片抗虫有效成分的分离纯化及性质表征研究

本研究采用废弃物- - 苦瓜叶片为植物源进行生物农药开发研究，在确定了苦瓜叶片具有抗虫作用的基础上，通过对苦瓜叶片各组分的分离、纯化和鉴定，筛选出新的抗虫有效成分（活性成分或先导化合物），并对有效成分进行多尺度的性质表征研究。利用供试昆虫对抗虫有效成分进行抗虫生物检测，获取抗虫有效成分的致毒作用及效率。为研制新的无污染生物农药奠定基础，该研究是利用生物本身的抗虫有效物质来抑制害虫从而达到无公害治虫的效果，这在生物综合治理方面是一条减少化学农药用量，保护生态环境的重要途径；对害虫生物防治、无公害蔬菜和食品的生产及农业可持续发展具有重要理论意义和实用价值；该项目研究成果将为开发利用新型高效杀虫生物农药奠定基础、开拓新路、丰富植物抗虫性理论。

按照计划工作如下：. 通过对苦瓜叶提取物化学分离结合抗虫生物活性检测，在石油醚、乙酸乙酯、正丁醇三种萃取液及萃取后残余液中，以正丁醇萃取液的抗虫作用最强，再从正丁醇萃取液中分离到四个具有抗虫活性的化学组分，分别是：BML3-F06、BML3-F07、BML3-F12和BML3-F15，通过生物检测，这四个组分都对小菜蛾幼虫具有较强的拒食作用，其中以BML3-F07和BML3-F12拒食作用最强。对这四个组分的进一步生物检测表明，四种抗虫活性组分对小菜蛾幼虫、菜粉蝶幼虫的生长均具有明显的抑制作用；对菜粉蝶幼虫具有较强的毒杀作用，其中以BML3-F12组分毒杀作用最强。 .最后用苦瓜叶正丁醇萃取液处理小菜蛾幼虫，对其保护酶活力的变化进行了研究，初步探讨了其致毒机理，结果表明，处理后的小菜蛾幼虫体内三种保护酶活力均发生较大变化，体内的SOD活力水平明显低于正常虫体，而POD和CAT活力水平却高于正常虫体。SOD及POD对药剂反应敏感。说明小菜蛾幼虫体内保护酶体系在药液的影响下发生了一定程度的失衡，进而说明苦瓜叶抗虫次生物质对试虫保护酶体系产生了破坏作用，这可能就是苦瓜叶正丁醇萃取液对试虫产生毒杀作用的机理之一。.我们将以上研究结果，整理申请了国家发明专利2项，今年均获授权，专利名及专利号分别是：（1）一种苦瓜叶乙醇提取物化学成分的检测方法（201010225324.7）；（2）一种苦瓜叶乙醚提取物化学成分的检测方法（201010225332.1）。同时，将另一些研究结果提炼整理成文，投出论文两篇，其中题名为：“苦瓜叶片正丁醇萃取液对小菜蛾取食及生理特性的影响”一文在2013年1月出版，见附件。