全反式视黄酸(ATRA)拮抗糖基化终末产物受体(RAGE)通路抑制糖尿病心肌再灌注损伤机制的研究

糖基化终末产物受体（RAGE）途径是糖尿病心肌再灌注损伤（I/R）的主要机制之一，目前无有效干预措施。本研究以全反式视黄酸（ATRA）干预糖尿病小鼠心肌梗死后I/R，使血清LDH、CK释放、梗死区域面积、凋亡细胞数量和左室功能损害均下降，Western印迹发现RAGE下游凋亡信号蛋白以及ERK、SAPK/JNK、p38MAPK活性显著降低，而ADAM10水平升高，体外用ATRA干预的离体心肌细胞后，发现培养液中sRAGE水平升高。结合文献提示ATRA可能通过上调ADAM10转录－>使RAGE切割增加－>sRAGE产生增加－>导致RAGE通路受抑。后续研究拟应用RAGE拮抗剂sRAGE和RAGE基因敲除小鼠，通过细胞水平和在体模型两方面探讨糖尿病心肌I/R中ARTA抗凋亡作用机制和与RAGE效应的联系，以期阐明ATRA在糖尿病心肌I/R中的防护机制，为有效防治提供基础。

本项目研究主要通过离体和在体实验研究证实全反式视黄酸（ATRA）通过激活其核受体上调ADAM10转录翻译，切割糖基化终末产物受体（RAGE），从而降低心肌再灌注损伤。在体实验研究中，我们通过培养心肌细胞株（H9C2），在不同浓度ATRA干预下进行缺氧再氧实验模拟心肌缺血再灌注损伤（I/R），细胞活性分析、TUNEL染色和流式细胞分析结果证实ATRA对I/R具有浓度依赖性保护作用，同样、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）等Western印迹分析也显示ARTA具有减少凋亡信号表达的作用，而siRNA干扰ADAM10后这一保护效应显著减弱。在体研究结果显示，在有ATRA干预的情况下，I/R梗死面积减小，心超显示左室收缩功能增强，相关凋亡信号蛋白表达减弱，而在RAGE-/-小鼠中上述保护效应减弱。本研究结果证实ATRA主要通过抑制RAGE效应减轻I/R损伤。