东亚飞蝗乙酰胆碱酯酶基因克隆及其靶标不敏感性机制研究

近年来，我国东亚飞蝗的发生呈加重趋势，对其生化及分子毒理学研究具有重要意义。本项目针对我国东亚飞蝗不同自然种群，选择有代表性的有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂进行生物测定，确定不同种群对上述杀虫剂的敏感度谱；对上述种群乙酰胆碱酯酶进行纯化并分析其生化特性，选择与生物测定相对应的有机磷和氨基甲酸酯类抑制剂对酶进行体外抑制，分析不同种群乙酰胆碱酯酶的敏感性差异；分离克隆敏感乙酰胆碱酯酶基因的全序列；根据所获得的全序列，用RT－PCR方法扩增若干不敏感乙酰胆碱酯酶基因的编码区序列并进行比较，找出突变位点；采用PASA－PCR和SSCP方法建立分子检测技术,用于对田间自然种群靶标不敏感性检测。通过了解东亚飞蝗不敏感乙酰胆碱酯酶分子结构的变化，将有可能针对变化了的分子结构设计特定的靶标杀虫剂，为东亚飞蝗综合治理实践中合理施用高效、低毒、低残留杀虫剂提供科学的技术指标。