O-糖基化蛋白糖链的非还原性解离及同时标记新方法研究

糖基化是蛋白质后修饰最重要的方式之一，对蛋白质生物学功能的正确发挥起着至关重要的作用。糖基化蛋白糖链的结构与功能的研究，有助于最终阐明参与糖链合成的有关糖基转移酶和糖苷酶表达基因的功能，也有助于搞清糖链在整个机体发育过程中的调控作用及相关疾病发生的机理。研究糖链的结构，首先需要将糖链从糖蛋白上解离下来。对N－糖链的解离方法比较成熟。对O－糖链的解离，目前常用的方法是还原性强碱消除法，该方法的缺点是破坏了还原性糖链末端的醛基，而醛基是糖链后续分析衍生化标记的关键官能团。本研究拟发展新的O-糖基化蛋白糖链的非还原性解离及同时标记技术，从糖链的解离到糖链的富集和分离纯化再到分析检测形成完整稳定可靠的方法。该方法的建立使解离后O-糖链的后续分离检测非常简便，并且可以提高糖链在质谱分析上的灵敏度，具有传统方法不可比拟的优点，对微量生物糖链分析有着重要意义,必将促进功能基因组学和功能糖蛋白质组学研究。