花生四烯酸细胞色素P450表氧化物酶基因CYP2C8及代谢通路抑制剂对动脉粥样硬化的保护机制

动脉粥样硬化是多因素驱动的慢性炎症性疾病，抗炎和改善内皮细胞功能的治疗能起到显著的抗动脉粥样硬化效应。花生四烯酸（AA）经细胞色素P450（CYP）表氧化酶代谢生成四种不同的表氧化产物EETs，既往经过我们十余年的系列研究发现AA-CYP表氧化酶及其产物EETs在心血管系统具有保护内皮细胞、抗炎、松弛平滑肌细胞作用，高度提示它们可能具有显著的抗动脉粥样硬化作用，但AA-CYP表氧化酶CYP2C8在内皮细胞高表达是否有抗动脉粥样硬化作用目前国内外没有研究。本项目将用ApoE-/-小鼠与CYP2C8内皮特异性转基因鼠杂交并诱导成动脉粥样硬化来探讨CYP2C8基因对动脉粥样硬化的作用及其机制，同时采用加或不加EETs代谢抑制剂，评价EETs在动脉粥样硬化发生中的重要作用以及CYP2C8基因的作用，这将为阐明CYP2C8生理效应提供新的理论依据，也为动脉粥样硬化的治疗提供一个崭新的思路。

动脉粥样硬化是多因素驱动的慢性炎症性疾病，抗炎和改善内皮细胞功能的治疗能起到显著的抗动脉粥样硬化效应。花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶CYP2C8/ CYP2J2在内皮细胞高表达是否有抗动脉粥样硬化作用目前国内外没有研究。本研究系统地研究了CYP2C8/CYP2J2基因对动脉粥样硬化的保护作用及其机制。.我们采用蛋白免疫印迹、ELISA、流式细胞术、Transwell侵袭实验等实验技术，发现CYP2C8基因过表达能够上调内皮细胞eNOS蛋白表达水平发挥内皮细胞保护作用，能够减少TNF-α诱导内皮细胞及巨噬细胞的炎症因子水平的升高显著抑制炎症反应, 能够抑制TNF-α诱导内皮细胞的ROS 产生发挥抗氧化应激作用，另外，CYP2C8基因过表达能够下调血管平滑肌细胞的迁移。综上所述，CYP2C8基因过表达能够通过PPARγ/ROS/NF-κB通路发挥抗炎作用及抗氧化应激作用从而发挥潜在的抗动脉粥样硬化效应。.我们用高脂饮食诱导APOE-/-小鼠建立动脉粥样硬化病模型，并通过转染rAAV-CYP2J2研究CYP2J2 基因过表达对高脂饮食诱导的ApoE-/-小鼠的动脉粥样硬化的形成的影响，通过形态学和组织学检测，发现CYP2J2基因过表达可以明显抑制高脂饮食诱导的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的形成；不仅如此，EETs代谢抑制剂TUPS也明显抑制动脉粥样硬化的形成；我们还用细胞转染、免疫组化、免疫印迹、流式细胞术、染色质免疫共沉淀等技术，发现CYP2J2的过表达可能通过AKT1-FOXO1-BIM通路抑制HUVEC细胞的凋亡来阻止动脉粥样硬化的形成和发展。.本研究从细胞水平和动物模型方面探讨了CYP2C8/CYP2J2与动脉粥样硬化的关系，证实了CYP2C8/ CYP2J2及其代谢产物能抑制动脉粥样硬化的形成，为动脉粥样硬化的防治提供了新的理论依据。.