益气活血法对急性心肌梗死大鼠外周循环内皮祖细胞集落数目和功能的影响及机制探讨

How to promote restoration of coronary artery endothelium after AMI is an important topic of reperfusion therapy. And the amount and function of endothelial progenitor cells （EPCs） is the key of regulating endothelial function. There is no effective method to regulating the amount and function of EPCs, so TCM drugs based on replenishing qi to activate blood method has a special research prospect. This research expects to interpose AMI rats with Buyanghuanwu decoction. EPCs are isolated by density gradient centrifugation method and cultured. And use Dil-acLDL and FITC-UEA- 1 identification. Observe the multiplication capacity and the migration and adhesion ability of EPCs with methods of MTT and improved Boyden cell and adhesive capacity experiment. The effect of traditional Chinese medicine combined statin will be also observed. We want to study the effect of the combination method on H2O2 inducing EPCs apoptosis and the relationship with PI3K／Akt signals channel at the cytological level. To explore effective medicine which can improve the amount and function of EPCs.

如何促进急性心肌梗死后（AMI）的冠脉内皮修复已经成为了AMI治疗的后灌注时代的一个重要议题，而内皮祖细胞（EPCs）的数量和功能则是调节内皮功能的关键。目前尚缺乏对内皮祖细胞数量和功能的有效调控手段，而中药益气活血法有其独特的研究前景。本研究拟采用补阳还五汤对AMI大鼠进行干预，与阿托伐他汀钙对比，运用密度梯度离心法分离并培养EPCs，并行Dil-acLDL和FITC-UEA-1双标鉴定，采用MTT比色法、改良的Boyden小室和粘附能力测定实验分别观察EPCs的增殖能力、迁移能力和粘附能力，并观察中药联合他汀类药物的作用效能，同时在细胞学水平研究该法对H2O2诱导EPCs凋亡的影响及其与PI3K／Akt信号通道的相关性，为寻找改善EPCs的数量和功能的有效药物做出有益的探索。

如何促进急性心肌梗死后（AMI）的冠脉内皮修复已经成为了AMI治疗的后灌注时代的一个重要议题，而内皮祖细胞（EPCs）的数量和功能则是调节内皮功能的关键。目前尚缺乏对内皮祖细胞数量和功能的有效调控手段，而中药益气活血法有其独特的研究前景。本研究拟采用补阳还五汤对AMI大鼠进行干预，与阿托伐他汀钙对比，运用密度梯度离心法分离并培养EPCs，并行Dil-acLDL和FITC-UEA-1双标鉴定，采用MTT比色法、改良的Boyden小室和粘附能力测定实验分别观察EPCs的增殖能力、迁移能力和粘附能力，并观察中药联合他汀类药物的作用效能，同时在细胞学水平研究该法对H2O2诱导EPCs凋亡的影响及其与PI3K／Akt信号通道的相关性。结果显示，补阳还五汤联合他汀类药物较单纯的中药或西药治疗可更好的改善AMI大鼠的内皮功能，减轻氧化应激引起的EPCs细胞凋亡，中西医结合组这种作用出现的更早，而这种作用可以被PI3K/Akt通路抑制剂所抑制。补阳还五汤含药血清可维持氧化应激状态下的PI3K/Akt通路mRNA表达水平、蛋白表达及蛋白磷酸化水平，而这种作用可以被PI3K/Akt通路抑制剂大部分抑制，在蛋白表达及磷酸化部分抑制剂不能完全抑制中药含药血清的作用，提示补阳还五汤干预氧化应激可能存在除PI3K/Akt通路以外的途径，值得进一步的研究。研究为改善急性心肌梗死患者内皮功能障碍提供了新的思路，但仍需进一步的在体实验研究及结合大样本临床研究进一步探索和验证。