PTHrP核定位序列与C末端调控少突胶质前体细胞发育的机制研究

理解少突胶质细胞(OLs)的发育机制对脱髓鞘病变的研究与治疗具有重要指导意义。我们前期研究发现，甲状旁腺素相关肽（PTHrP）核定位序列（NLS）与C末端缺失（PTHrP KI）的小鼠脑与脊髓中髓鞘碱性蛋白（MBP）阳性的OLs发育与电生理功能障碍，p27表达显著上调。提示PTHrP NLS可能通过p27介导影响OPCs的增殖、分化。本项目拟采用PTHrP KI及p27 KO小鼠，分别从整体、细胞和分子水平研究PTHrP NLS和C-末端在少突胶质前体细胞(OPCs)增殖和向OLs分化、成熟中的作用及机制。本研究有望阐明OLs发育调控的新机制，为脱髓鞘疾病的治疗提供新靶点。

1）甲状旁腺素相关肽（PTHrP）在小鼠中枢神经系统及少突胶质细胞上均有广泛表达，提示PTHrP在CNS发育及少突胶质细胞发育中可能发挥重要作用。.2）体内结果显示：PTHrP 核定位序列（NLS）与C末端缺失引起小鼠脑与脊髓的p27, p21，p16等细胞周期蛋白激酶抑制因子（CDKI）表达上调，DNA损伤加剧（ROS上调，8（OH）dG阳性细胞增加），及抗氧化应激能力下降（T-SOD, GSH-px, 及CAT等抗氧化酶表达下调），导致OPC增殖降低、凋亡增加，从而导致少突胶质细胞的发育成熟及功能障碍。体外结果显示PTHrP NLS与C末端缺失亦可直接上调OPC的ROS水平，从而抑制增殖、促进凋亡，影响OPC的分化与成熟。上述结果初步证实PTHrP NLS与C末端可通过下调p27, p21，p16的表达，抑制氧化应激反应而促进OPCs的增殖、分化与成熟。.3）p27敲除可通过上调Shh通路相关分子的表达而部分纠正PTHrP 核定位及C-末端缺失所致的少突胶质细胞发育障碍，但仍未及野生型水平。提示p27可部分介导PTHrP 核定位与C末端对OPC发育的作用。.4）PTHrP87-139蛋白可部分延长PTHrP NLS及C-末端缺失小鼠的存活期及体重变化。.上述研究结果初步证实PTHrP 87-139可通过下调p27,p21,p16等的表达，及抑制氧化应激，从而促进增殖，抑制凋亡，而促进少突胶质细胞的发育成熟。