Leprdb/+胎鼠诱发孕鼠妊娠期糖尿病的机制研究

妊娠期糖尿病（GDM）为妊娠期特发的不同程度的糖耐量降低，其发病机制尚不完全清楚。研究表明，胎儿异常基因型可能引起母体相关病理生理改变；GDM孕妇孕激素及瘦素水平显著高于正常，两者正相关。本课题假设：GDM的发生机制之一可能为胎儿异常基因型使母体瘦素基因表达异常，致糖代谢异常，引起GDM发病。我们前期研究以瘦素受体杂合子小鼠为GDM动物模型，观察到不同基因型胎鼠对孕鼠孕激素、葡萄糖耐量及胰岛素分泌的影响程度不同，分析胎鼠基因型可能为诱发母鼠GDM的因素。为进一步验证该假设，拟（1）检测不同胎鼠基因型孕鼠孕激素及瘦素水平，及leptin甲基化情况，了解GDM中母鼠血清孕激素水平是否与其leptin基因甲基化，瘦素表达及分泌相关；（2）体外培养人骨骼肌细胞，用RNAi等方法明确孕激素对leptin基因表达的调控作用。为明确GDM发病机制，及其预防和治疗提供理论依据。

妊娠期糖尿病(Gestational Diabetes Mellitus，GDM)给母儿健康带来严重危害。研究揭示许多组织中脂肪因子瘦素与胰岛素存在着双向调节作用，而妊娠期糖尿病患者无论是母体还是宫内的胎儿都存在瘦素的高表达及明显的瘦素抵抗。因此，近年来瘦素在GDM中的作用越来越受到重视。.本课题就胎鼠基因型是否为诱发母鼠GDM发生的原因进行了研究，发现无论子鼠为什么基因型，正常野生型母鼠孕期的糖代谢无明显异常，C57BL/Ksj Lepr db/+母鼠后代中无论有无C57BL/Ksj Lepr db/+胎鼠，都表现出异常的糖耐量下降。与本课题提出的胎鼠瘦素受体基因型参与母鼠妊娠期糖尿病发病的假说不相符。因此本课题将重点放在瘦素参与妊娠期糖尿病糖脂代谢的机制探索上。通过比较C57BL/Ksj Lepr db/+小鼠和正常鼠糖耐量及血清胰岛素、瘦素水平，分析发现C57BL/Ksj Lepr db/+是GDM良好的动物模型；利用该GDM模型鼠测定GDM鼠与正常鼠胎盘瘦素表达水平，得出GDM鼠胎盘瘦素表达高于同期正常孕鼠，该基因启动子区甲基化水平明显低于正常孕鼠；接着在不同浓度孕酮下培养人滋养层细胞，发现滋养层细胞中瘦素基因启动子区甲基化水平随孕酮水平升高而降低，而瘦素表达水平与孕酮浓度呈正相关；不同浓度孕酮培养正常的和抑制DNMT1基因表达的滋养层细胞，证实DNMT1基因被沉默的细胞中瘦素表达明显升高，但与孕酮水平无明显相关性。 .综上，本课题组通过动物实验及细胞培养证实了：1.C57BL/Ksj db/+雌鼠糖代谢特点及胰岛素、瘦素的异常表达与GDM相似，是GDM良好的动物模型；2. C57BL/Ksj db/+孕鼠和正常孕鼠胎盘组织瘦素水平升高，与瘦素基因启动子甲基化水平呈负相关；3.孕酮可上调滋养层细胞瘦素的表达，这可能是通过影响表观遗传修饰实现的。这些研究结果揭示了瘦素基因启动子区甲基化与妊娠期糖尿病糖代谢异常相关，从表观遗传学角度探索妊娠期糖尿病的发病机制，为GDM发病机制提供了理论依据。目前本课题组已发表论文6篇，英文论文2篇已投稿审稿中；共培养硕士研究生4名。