促前胸腺激素(PTTH)是调控家蚕生长发育的一种关键的神经肽,对PTTH启动子结构和功能的阐明将有助于我们对其作用机理的了解。标记家蚕PTTH基因转录起始位点两侧片段作为探针,与家蚕脑核蛋白因子进行凝胶阻滞结合分析(EMSA),再进行竞争性结合和突变结合分析等,确定启动子区域结合转录蛋白因子的碱基位置和序列;构建含PTTH启动子不同区域的报告质粒,进行PTTH启动子转录活性分析,再进行突变分析和共转染等分析,判断转录蛋白因子的种类。利用纯化转录蛋白因子或重组表达转录蛋白因子的方法,鉴定转录蛋白因子的种类。调查保幼激素和蜕皮激素对家蚕PTTH启动子转录活性的影响和其对家蚕PTTH mRNA表达的影响。通过上述研究将阐明家蚕PTTH启动子的结构和其调控机制,具有潜在的应用前景;同时本研究建立的方法,也将有助于研究家蚕其它功能基因的转录调控。
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数据更新时间:2023-05-31
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