云南石斛属三种药用植物酚类化合物的抗肿瘤活性研究

In our previous studies, phenols(fluorenones,phenanthrenes and bibenzyls), which showed the significant cytotoxic inhibition against human tumor cell lines, were isolated from Dendrobium chrysotoxum in Yunnan Province. With an aim to further systematically access the chemical library, antitumor activity and structure-activity relationship, continuing study on the three representive plants, which were collected in Yunnan Province. And base on the above studies, the effection evaluations of the human tumor cell lines inducing apoptosis will carry out to obtain active precursor compounds. Compared to other clinical natural agents, the structures of phenols isolated from Dendrobium species were relatively simple, which have potential medicinal value. The proposed project will open a new field of phenols agents study, and will benefit it's internationalization and technologicalization development.

在前期工作中已发现，云南石斛属药用植物鼓槌石斛含有系列酚类化合物，经细胞毒筛选实验表明其中的芴酮、菲类和联苄类化合物具有显著的抑制人肿瘤细胞活性。本项目拟继续从云南石斛属三种代表性的传统药用植物中分离酚类化合物，构建一个小型酚类化合物库，并对其进行抗肿瘤活性筛选及构效关系评价。在此基础上，进一步进行该类化合物诱导肿瘤细胞凋亡作用评价，以期发现具有较好抗肿瘤作用的先导化合物。为开发利用当地传统药用植物奠定基础。石斛酚类化合物较其他应用于临床的天然抗肿瘤药物合成及结构修饰相对简单，具有潜在的药用价值。因此，研发这类具有我国独立知识产权的新药，具有紧迫的现实意义和深远的应用前景。

石斛是常用名贵中药材, 为兰科 (Orchidaceae) 石斛属(Dendrobium Sw.)多种植物的新鲜或干燥茎的统称。我国76种石斛属植物中有30多种作药用。在《神农本草经》中, 石斛被列为上品, 具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳、明目强身等功效。近年来，国内外对石斛的开发应用较多。石斛属植物生长条件苛刻，随着环境的破坏及人为掠夺性采挖，资源越来越少，有些物种已濒临灭绝的边缘。一些药典未收载的石斛属植物常混作石斛类药材应用。为了解这些植物的化学成分及其活性，我们对云南产球花石斛、束花石斛、鼓槌石斛的化学成分和药理活性进行了研究。. 球花石斛全草通过溶剂提取、硅胶柱层析、制备薄层层析和Sephadex LH-20柱层析等方法共分离和鉴定了28个化合物。通过波谱分析（核磁共振氢谱、碳谱、DEPT谱、H-H COSY谱、HSQC谱、HMBC谱、NOESY谱和质谱等）鉴定了它们的结构，包括芴酮、联苄、菲、菲醌、其它芳香族化合物和甾体等类型，其中酚类化合物20个；束花石斛全草通过溶剂提取、硅胶柱层析、制备薄层层析和Sephadex LH-20柱层析等方法分离鉴定了24个化合物，其中酚类化合物15个；鼓槌石斛全草通过溶剂提取、硅胶柱层析、制备薄层层析和Sephadex LH-20柱层析等方法分离鉴定了25个化合物，酚类化合物18个。. 项目组从三种药用植物石斛中分离鉴定了77个化合物，用MTT法对所分离得到的酚类化合物抑制肿瘤细胞增殖活性进行评价。对三种药用植物中分离所得酚类化合物芴酮、菲类和联苄类型对人白血病细胞株(HL-60)、人肝癌细胞株(BEL-7402)抑制活性测试，结果表明这些化合物体外均有不同程度的抑制人白血病细胞株、人肝癌细胞株活性。项目研究的意义在于为石斛资源植物的开发、利用和研发石斛新药提供了物质基础。