猪繁殖与呼吸综合征病毒通过胎盘屏障感染胎儿的细胞受体机制研究

PRRS是由PRRSV引起的以呼吸系统和生殖系统疾病为特征的传染病。PRRSV通过其特异性的受体以细胞内吞的方式感染细胞，目前已有唾液酸粘附素受体、似肝磷脂蛋白受体、CD163以及波形蛋白4个明确的PRRSV细胞受体。本研究室最近检测到一个存在于MA-104和猪肺泡巨噬细胞上新型PRRSV蛋白受体。本项目以分别在妊娠早期、中期和晚期接种了PRRSV的母猪为研究对象，观察临床症状，对血清中生殖激素水平、病毒血症、抗体水平及组织中的激素受体之间的关系进行了研究；定期剖杀母猪，对母猪生殖器官及胎儿各脏器中的5种病毒受体、PRRSV的分布和载量及组织病理学进行研究。以期明确临床症状、生殖激素、生殖激素受体、病毒抗体、病毒血症5者关系，明确5种病毒受体、病毒在生殖器官和胎儿各个脏器中的分布与组织病理变化关系，阐明5种病毒受体在胎儿感染中的作用，明确PRRSV通过胎盘屏障感染胎儿的细胞受体机制。

PRRS为当前危害养猪业的首要传染病之一。PRRS以母猪妊娠障碍及各年龄段猪呼吸系统障碍为特征，PRRSV能垂直感染，即使是弱毒疫苗株也能通过胎盘屏障感染胎儿，所以母猪是PRRSV传播的一个非常重要的不可避免的媒介。PRRSV导致母猪妊娠异常带来的经济损失要远远高于对育肥猪、仔猪的呼吸系统障碍的影响。母猪的健康与否不仅影响仔猪而且还影响我国优良猪群的品种保留。因此明确PRRSV引起繁殖障碍的机制乃是当前研究的重点和首要任务。. 本项目为研究高致病性PRRSV对母猪妊娠影响及通过胎盘屏障机制，人工感染妊娠不同时期的母猪，感染组出现了明显的食欲下降、体温升高等临床症状。血清中检测到了抗N蛋白特异性抗体及PRRSV。大体剖检发现，感染组的猪均有间质性肺炎等变化。病理组织学观察发现感染组猪肺出现肺泡壁充血，炎性细胞浸润等间质性肺炎的变化，妊娠后期和中期相比，其生殖器官及病毒性脑炎的病变更加明显。免疫组织化学对高致病性PRRSV定位分析发现妊娠中后期，PRRSV抗原阳性信号出现在淋巴组织等器官，胎儿的消化道 肺、肾及大脑内也检测到PRRSV。以上的结果表明成功的建立了高致病性PRRSV感染的妊娠母猪模型。. 为研究PRRSV感染与生殖激素及其受体的关系，本项目对收集的血清中的的胎盘素、LH、E2、FSH及PROG进行测定，同时对妊娠最主要激素受体即PROG受体在生殖器官中的分布进行了检测，结果表明不同妊娠时间五种激素水平的变化均不显著，但生殖器官中孕激素受体的表达量降低。这说明高致病性PRRSV可能通过影响激素受体的表达导致繁殖障碍。. 为了研究PRRSV通过胎盘屏障及血脑屏障的受体机制，建立Real-time PCR方法检测高致病性PRRSV感染后组织器官上PRRSV细胞受体的表达情况。检测结果表明胎盘、卵巢、输卵管、大脑、脑膜及脾脏中含量最丰富的是NMHC II-A及SN。CD151及CD163在脾脏及卵巢中表达量较高。VIM在检测的细胞受体中含量最低，并且其变化也不明显。脾脏及卵巢中高致病性PRRSV在含量最高，其细胞受体含量也相似，均是SN最高，其次是NMHCII-A，再次是CD163和CD151，其他器官中CD163含量较低，PRRSV含量也较低，这反应了CD163可能与PRRSV感染有着密切关系。