反刍动物布鲁氏菌病免疫预防的基础研究

Brucellosis is one of the most serious diseases for ruminants. Prevention, control and eradication of brucellosis is important for ruminant aquaculture. In this project, we firstly investigate epidemiology and risk factor of ruminant animal in Liaoning Province. Proteome array based antibody profiling and Peripheral blood lymphocyte cell immunity technology are used to compare the response differences after immunization and infection and identify differential diagnostic antigens. Targeting the newly identified antigens, their roles in pathogenesis was analyzed to study the intracellular survival mechanism of Brucella. Feasibility of using them as signature gene vaccines are tested. Their interacting target in autophagy pathway and regulation roles are further analyzed. With these results, it is possible to provide information for ruminant brucellosis control program, vaccine immunization prevention, and development of new vaccine.

布鲁氏菌病是严重危害牛羊等反刍动物养殖业的重大疫病，该病的免疫预防、控制与净化对于反刍动物养殖业的发展具有重要意义。本项目拟在前期研究基础上，在辽宁省内开展牛、羊布鲁氏菌病流行病学研究，掌握布病免疫预防效果、流行规律及风险因素；利用全蛋白质组芯片技术和外周血淋巴细胞免疫分析技术，比较疫苗免疫和自然感染后抗体谱和细胞免疫的变化规律，发现疫苗免疫与自然感染的鉴别诊断抗原，并建立鉴别诊断方法；分析重要抗原蛋白在布鲁氏菌胞内寄生中的作用并深入解析其作用于宿主自噬途径建立胞内寄生的分子机制，为研发新型标记疫苗奠定基础。综合以上数据系统阐明反刍动物免疫预防的关键科学问题，为反刍动物布鲁氏菌病的防控提供理论依据和技术支撑。

布鲁氏菌病是严重危害牛羊等反刍动物养殖业的重大疫病，该病的免疫预防、控制与净化对于反刍动物养殖业的发展具有重要意义。本项目开展了反刍动物布病流行病学、体液免疫、细胞免疫、抗原基因在布鲁氏菌胞内寄生中作用等应用基础研究，基于基础研究结果开发了基因标记疫苗及鉴别诊断技术。本项目完成了辽宁省布病时间与空间分布规律及其变化趋势的研究，识别了布病高风险区域及发病率快速变化的区域，为辽宁省开展布病的重点区域防控，防止疫情蔓延发挥了重要理论指导作用。项目研发了布鲁氏菌全蛋白组芯片并建立了抗体谱分析技术，基于抗体谱系统分析了布鲁氏菌野毒株和疫苗株感染后诱导产生抗体的规律，发现了新的具有抗原性的基因，以及可区分感染和免疫的候选抗原标识。基于野毒株与疫苗株蛋白质组和基因组水平差异，发现了可用于疫苗株鉴别的特征性核酸标识和鉴别诊断抗原，为鉴别诊断技术的开发提供了理论支撑。在抗体谱和蛋白组研究的基础上，开展了基因标记疫苗的研究，构建了一系列基因标记疫苗，从中筛选出了具有开发潜力的标记株。完成了基因标记疫苗A19-△virB12临床申报注册所需的系列研究和评价，成功获批了国际上第一个布鲁氏菌基因标记疫苗，开发了鉴别诊断技术和试剂盒，为反刍动物布病的控制和净化提供了关键技术支撑，疫苗上市后取得了良好的经济和社会效益。