布鲁氏菌病快速诊断技术研究

In recent years,zoonosis has become a main emerging public infectious disease .It is necessary to study on the rapid and accurate detection technology of its ralated pathogens. The topic of this study is to design a specific fusion protein antigen of three kinds of Brucellosis pathogens with higher prevalence including Brucella melitensis, Brucella abortu and Brucella suis by using of fusion protein technology,and to obtain a method aiming at the rapid-accurate detection of Brucellosis in samples by using magnetic nanotechnology and quantum dot labeling technique and the principles of immunology. This topic research contents include:① preparation and characterization of surface-functionaled magnetic nanoparticles;② preparation and characterization of three kinds of Brucella bacteria specific fusion protein ;③ the preparation of magnetic nano-biological probe; ④ preparation of the immunization fluorescence quantum dots; ⑤ rapid detection of the samples by means of fluorescence spectrophotometer.The purpose of this research is to design and prepare magnetic nano-biological probe and fluorescent quantum dot bio-probes with our own intellectual property and broad prospect ,which can be used to detect Brucellosis rapidly and accurately.

近年来，人畜共患传染病已成为公共卫生传染病的主要疾病，加强对其同步、快速、准确的检测技术研究十分必要。本课题利用融合蛋白技术设计合成羊布鲁氏菌、牛布鲁氏菌以及猪布鲁氏菌三种发病率较高的布鲁氏菌病病原菌的特异融合蛋白，联合磁纳米技术和量子点标记技术，利用免疫学的原理实现对待检样品中布鲁氏菌病的快速准确检测。课题的主要研究内容包括：①表面功能化磁性纳米粒子的制备及表征；②三种布鲁氏菌病病原菌特异融合蛋白的制备及鉴定；③磁性纳米生物探针的制备；④免疫化荧光量子点的制备；⑤荧光分光光度计对待检样品进行快速检测。课题研究的目的是设计制备具有我国自主知识产权和广泛应用前景的，能实现对布鲁氏菌病快速、准确检测的磁性纳米生物探针和荧光量子点生物探针。

布鲁氏菌病是一种人兽共患传染病，近年来发病率呈逐年上升的趋势，布鲁氏菌病不仅会造成感染动物流产，给畜牧业带来巨大经济损失，而且会给人类的健康造成巨大危害。因此，对布鲁氏菌病的诊断、预防和监督已经引起世界各国的广泛重视。本课题研究的重点是利用融合蛋白技术、免疫磁珠分离技术以及量子点荧光标记技术等制备能够同步快速富集分离检测血清中布鲁氏菌抗体的方法，实现布鲁氏菌病的快速检测。. 目前课题研究工作已经完成，并取得较为满意的成果。课题研究情况如下：1）完成了表面功能化磁性纳米粒子的制备及表征，获得了形状规则、粒径均一的磁性纳米粒子；2）完成了布氏杆菌特异抗原融合蛋白的制备及鉴定，获得了纯度较高、抗原性良好、能够特异性识别布鲁氏菌抗体的融合蛋白；3）完成了免疫化磁性纳米粒子的制备，获得了能够特异性富集布鲁氏菌抗体的磁性纳米探针；4）完成了荧光量子点的制备及表征，获得了荧光性能良好、粒径均一的荧光量子点；5）完成了荧光量子点标记生物探针的制备，获得了能够识别布鲁氏菌抗体的荧光量子点探针；6）建立了布鲁氏菌病快速检测方法，获得了能够快速、灵敏、准确检测布鲁氏菌病的方法；7）研究成果已申请发明专利2项，在国内外期刊上发表论文5篇。培养了1名硕士和2名博士研究生。. 本课题研究所建立的布鲁氏菌病快速检测方法有望应用于临床检验、卫生检验检疫等部门，若该研究成果得以应用必将产生较大的社会效益和经济效益。