苗药吉祥草止咳作用物质基础及其机制的研究

吉祥草为我国苗族地区常用止咳药材，其单方及以它为主药的中成药在止咳药品市场上占有较大份额（如贵州百灵的咳速停），但其药效物质和作用机制尚未见报道。前期研究中，我们采用活性跟踪的方法从吉祥草中分离得到1个胺醇型生物碱类化合物，药理实验表明，该化合物具有为吉祥草镇咳活性成分之一，其化学结构与临床上的常用镇咳药存在着较大差异，提示其可能成为新型的止咳药物。通过比较该化合物与吉祥草止咳活性部位的活性发现，该化合物的止咳活性弱于活性部位，我们推测吉祥草中可能含有止咳活性更强的成分。本项目拟申请自然科学基金对吉祥草止咳活性部位中化学成分继续进行研究，并对分离所得单体化合物的止咳作用进行研究，阐明其止咳构效关系，进而通过结构修饰，获得止咳作用最强的单体化合物，并对其止咳作用机制、成瘾性及是否兼具祛痰功能等问题进行深入研究，旨在阐明吉祥草止咳的物质基础，并探讨从中开发一类理想止咳新药的可能性。

本研究对吉祥草镇咳活性部位的化学成分及镇咳作用机制进行了研究，主要取得了如下研究成果：.1. 利用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、凝胶柱色谱，MPLC，制备HPLC等分离手段，从吉祥草60%乙醇洗脱部位及90%乙醇洗脱部位，分离得到个42化合物，通过光谱色谱手段鉴定了它们的结构，其中4个为新化合物，18个为属内首分，2个为新天然产物。生物碱类成分4个。.2、采用豚鼠离体气管模型，对11个甾体皂苷和2个生物碱的支气管平滑肌松弛作用进行了研究，发现除化合物9外，大多数化合物均有显著的生物活性，其中以甾体皂苷铃兰5-O-β-D-吡喃葡萄糖皂苷作用最强，强度为阳性对照药异丙肾上腺素的四分之一，体外实验表明甾体皂苷类亦为止咳的活性成分之一。.3、JXC-1（3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵）为小鼠氨水引咳模型中发现的含量较高的生物碱类活性成分。本研究采用化学合成方法对其进行结构改造，发现其可与甲醇钠反应，1，2位脱氯化氢形成2-羟丙烯基三甲基氯化铵。采用生物转化方法，对其进行结构改造，发现在燕麦镰孢，短刺小克银汉霉，总状共头霉，华根霉的作用下，JXC-1可发生降解，但无法得到生物碱。.4、急性毒性试验表明，JXC-1口服给药LD50为4.96 g/Kg，体内止咳实验中，JXC-1在1.5 g/kg的剂量能显著延长潜伏期；在1.0 g/kg和1.5 g/kg均能显著减少咳嗽次数，在1.0 g/kg具有一定的祛痰活性。止咳作用强度低于阳性对照药喷托维林，祛痰作用与阳性对照药氯化铵作用相当，JXC-1是兼具止咳活性和祛痰活性双重作用的止咳先导化合物。.5、对JXC-1中枢镇咳作用机制研究中，发现JXC-1对小鼠脑内5-HT的释放没有显著影响，纳洛酮对于JXC-1的镇咳活性无显著影响，说明该化合物不是通过5-羟色胺能受体和阿片能受体途径发挥作用的。我们推测可能与JXC-1水溶性强，难以透过血脑屏障有关。在外周镇咳机制中，发现格列苯脲可以拮抗JXC-1的镇咳活性，说明JXC-1可以通过作用于ATP敏感型钾通道而发挥作用，而JXC-1在组胺所致离体平滑肌收缩亦具有一定作用，因此推测JXC-1可以通过外周镇咳途径发挥作用。.6、本研究成果发表论文4篇，SCI论文3篇（其中2篇已接收），发表会议论文2篇，培养硕士生2人，完成了自然基金的计划内容。