基于肺内AM、IM迁移的归肺经中药升降浮沉药性辨识方法研究

Traditional Chinese medicine property of ascending and descending,floating and sinking is one of the main basis for guiding the clinical medicine.It has an important practical significance to apply their cognitive and characterization of the application of modern technology.Previous study found that Herba Ephedrae and Fructus Schisandrae treatment of Idiopathic Pulmonary Fibrosis,the differences of both mechanisms may lift drifting potency.The application for the theoretical basis of the theory on lung governing diffusion, purification and descending,starting from the lung of traditional Chinese medicine,in three steps.Firstly, observe the changes of Idiopathic Pulmonary Fibrosis at different time points of Alveolar Macrophage and Intercrop Macrophage,integration of colloidal gold particles labeling,MCP-1, MIP-1α technology,comparative effect of traditional Chinese medicine on pulmonary macrophage subpopulations Alveolar Macrophage and Intercrop Macrophage,analysis of the characteristics of drug action.Secondly,application of TGF-β1mRNA and HPLC-DAD-ECD-ELSD methods, to observe the effect of treatment on Alveolar Macrophage and Intercrop Macrophage growth,find its distribution and metabolic trend of intrapulmonary,application of in vitro experimental evidence for drug effects of Alveolar Macrophage and Intercrop Macrophage migration mechanism, use Fructus Viticis and Flos Inulae to show the action of lifting trend in common.Thirdly, combined with pulmonary system disease commonly used traditional Chinese medicine database, application software WEKA decision model,expanded repeat sample of drug selection range.Through this research,introduce the technology of cell migration, construction of lung channel tropism of Chinese medicine lifting resistance identification method, the rational use of drugs is beneficial to the basis of lifting resistance guide the lung diseases.

升降浮沉药性是指导中医临床用药的主要依据之一，应用现代科学语言对其进行认知和表征具有重要意义。前期研究发现麻黄、五味子皆能治疗肺纤维化，二者作用机制差异可能与升降浮沉药性有关。本申请在"肺宣发肃降"理论指导下，从肺经中药切入，分三步实施。第一，应用胶体金颗粒标示、MCP-1、MIP-1α等方法，观察肺纤维化不同时点肺泡巨噬细胞（AM）、肺间质巨噬细胞（IM）活性及含量变化，比较细胞迁移差异、分析药物作用特征。第二，应用TGF-β1mRNA、HPLC-DAD-ECD-ELSD等方法，观察中药对AM、IM生长影响，寻找在肺内分布和代谢趋势，体外实验探讨AM、IM迁移机制，蔓荆子、旋复花验证升降浮沉作用趋势的共性。第三，结合肺系病常用中药数据库，扩大选药范围、重复示例研究，应用WEKA软件进行决策分析。本项目整合细胞迁移等技术，建立归肺经中药升降浮沉药性辨识方法，有益于指导肺系病证合理用药。

升降浮沉药性是指导中医临床用药的重要依据，本项目以“归肺经”中药为示例，通过观察升降浮沉代表药物纠正肺泡巨噬细胞（AM）、肺间质巨噬细胞（IM）的动态迁移来辨识升降浮沉药性的作用趋势，主要科技创新体现在以下3个方面。. 第一，创新升降浮沉药性研究模式。本项目提出“升药为出、降药为入”研究假说，尝试建立一种基于 AM、IM 趋化迁移的升降浮沉药性辨识方法。研究发现，肺纤维化进程中血管新生调控因子失去平衡，麻黄、五味子均可改善失衡的血管新生因子表达，抑制趋化因子MCP-1、MIP-1α表达，降低TGF-β1等炎性因子水平，抑制促血管新生因子Ang-2、VEGF分泌；但二者的作用阶段有差异，麻黄主要作用于早期肺泡炎阶段，五味子主要作用于后期肺纤维化阶段，旋复花/蔓荆子也确证了这一规律。. 第二，科学评价AM、IM动态迁移。本项目观察受试中药对 AM、IM 生长影响，寻找在肺内分布和代谢趋势。研究发现，麻黄对AM细胞数量的抑制能力及趋化迁移能力较强，五味子对IM细胞数量的抑制能力及趋化迁移能力较强，其机制可能是麻黄主要促进AM细胞表面CCR2、CCR5受体蛋白的表达，将信号分子传递给其Kv1.3，Kv1.5离子通道，五味子主要促进IM细胞表面CCR5受体蛋白的表达，将信号分子传递给其Kv1.3，Kv1.5离子通道使细胞骨架的发生变化，最终促进细胞的趋化迁移。. 第三，合理指导肺系疾病联合用药。与地塞米松（Dex）联用后，麻黄配伍Dex作用增强且对不同病理阶段的作用强度无明显差异；五味子配伍Dex的作用较单用Dex降低且具有显著性差异。因此，中西药联用的药效差异主要体现为肺泡炎阶段麻黄与Dex配伍较单用麻黄疗效增强，肺纤维化阶段五味子与Dex配伍较单用五味子和Dex疗效降低。. 综上所述，本项目成果有自主知识产权，研究模式具有示范性，建立了升降浮沉药性研究平台，发表高质量学术论文8篇（其中2篇被SCI收录），拟出版中医药专业科普著作1套，培养出站博士后1人，晋升正高级职称1人，毕业硕士研究生5人，促进了中药药性理论研究方向研究团队的可持续发展。