Elongator复合物的组蛋白乙酰化修饰对肝癌细胞增殖的影响及其机制

The effect and its mechanism of histone acetylation by elongator comnplex on the growth of hepatocellular carcinoma (HCC) cells. The histone acetylation and the carcinogenesis of hapatocellular carcnioma remains closely related. The ELP3/Elongator specifically acetylates the histone H3 and H4, indicating the potential relation between ELP3/Elongator and HCC. This project investigates the expression of ELP3/Elongator in the HCC patients. The relation will be explored between the histone acetylation the the prolifearation, apoptosis, migration and cell cycle of HCC cells. Investigations will also be made for the difference between the wild Elongator and its mutants which is defient in the acetylaion ability to study the effect of histone acetylation in the carcinogenesis of HCC. Animal model will be made to examine the roles of Elongator in transcription and growth of the HCC.The project aim for a new marker for the diagnosis and treatment for the HCC patients.

组蛋白乙酰化与肝癌的发生和发展密切相关，而Elp3/Elongator对组蛋白H3和H4均具有特异性的乙酰化修饰功能,表明Elp3/Elongator的组蛋白乙酰化作用与肝癌之间可能存在内在的联系。本课题将通过检测肝癌组织中Elp3/Elongator的表达及组蛋白乙酰化水平，分析Elp3/Elongator与肝癌临床特性的相关性；建立过表达野生型和组蛋白乙酰化活性缺陷型的Elp3/Elongator肝癌细胞株，探索Elp3/Elongator的组蛋白乙酰化功能与肝癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭和周期调控等生物学特性的相关性；通过转录试验阐明Elp3/Elongator的组蛋白乙酰化功能在染色质结构重塑及转录中的作用；通过裸鼠成瘤实验，观察并分析肝癌细胞株在裸鼠体内的成瘤能力及其与Elp3/Elongator组蛋白乙酰化修饰的关系。本课题研究目标的实现将为肝癌的基础和临床研究提供新的靶点。

组蛋白乙酰化与肝癌的发生和发展密切相关，而Elp3/Elongator对组蛋白H3和H4均具有特异性的乙酰化修饰功能,表明Elp3/Elongator的组蛋白乙酰化作用与肝癌之间可能存在内在的联系。.我们的研究表明Elongator可以促进肝癌细胞的体外迁移和侵袭能力，而干扰Elp3和Elp4的表达则能够抑制这一现象。过表达Elp3或Elp4后AKT的磷酸化水平增强，MMP-2和MMP-9蛋白的表达也有所增强；同时稳定干扰Elp3表达和稳定干扰Elp4表达后AKT的磷酸化水平则显著降低。体内的肺转移实验表明，Elp3过表达的肝癌细胞明显促进其向肺部组织的转移。Elongator通过AKT的磷酸化作用促进肝癌细胞的迁移和侵袭。.AKT是细胞内重要的信号传导通路，参与细胞增殖、抗凋亡及迁移等多个过程。本研究探讨了AKT信号通路与Elongator诱导的肝癌细胞的迁移、侵袭等行为之间的相关性。以期为肝癌发病机制研究、治疗靶点的确定奠定理论基础。. 临床上肝癌对放射治疗极不敏感，我们进一步的研究发现，Elongator能够减轻由60Co γ射线辐照引起的肝癌细胞的DNA损伤，并有效促进细胞的增殖，抑制细胞的凋亡。我们通过彗星电泳检测和以γ-H2AX作为指标进行免疫荧光实验得出Elp3和Elp4促进肝癌细胞DNA损伤修复的结论。结果表明：Elongator可能通过PI3K/AKT信号通路促进HepG2细胞DNA损伤修复，Elp3和Elp4可能通过调控AKT蛋白的磷酸化水平，进一步调控MRE11、Ku70蛋白的表达量，促进肝癌细胞的DNA损伤修复。.Elp3已经报导存在的两个功能结构域，我们基于对Elp3蛋白序列结构域的已有认识，利用生物信息学同源建模的方法，构建以Elp3蛋白全长为基础的Trancation敲除表达质粒。研究Elp3在肝癌发生发展中的作用与HAT结构域的关系。当Elp3结构域的完整性受损时，Elp3促进迁移侵袭的功能以及促进DNA损伤修复的功能均有所缺失。