钙依赖型蛋白酶calpain介导的蛋白水解对粘附斑解体、转换的调控机制

细胞迁移，对许多生物学事件，如胚胎发育、创伤愈合、炎症反应、肿瘤侵袭、转移等至关重要。粘附斑的动力学调控是细胞迁移所必需的。本研究项目以粘附斑解体的免疫荧光显微观察，蛋白水解的western blotting检测，弄清Calpain1、calpain2对不同元件蛋白的水解效果。以talin磷酸化位点的定向突变,分析不同磷酸化位点对calpain2介导的粘附斑解体的效果，探讨calpain2对talin作用的分子机制。以FRET检测，分析粘附斑解体的变化情况与激活的Rac、RhoA蛋白，在活细胞中的时空图像的相互关联。以siRNA试验，分析当某种元件蛋白的表达受抑后，对calpain水解其它元件蛋白的影响。从而阐明calpain介导的蛋白水解对整合素诱导的粘附斑解体、转换的动力学调控机制。