监测活细胞中Rac、Cdc42诱导激活的时空图像的单分子探针

采用FRET技术，通过构建几种单分子DNA载体，经离体光谱及鸟核苷与GTPases联结分析证实其有效性后，转染细胞，在EGF诱导下，以激光扫描共聚焦显微成像系统（Confocal），观察激活的Rac、Cdc42在活细胞中，一定时间和空间范围内的持续变化，及引起的相应肌动蛋白细胞骨架的重组, 以建立这种基于FRET技术，可用于直接观察激活的蛋白分子在活细胞中的3D时空图像的活体单分子探针。根据FRET效率，探讨利用这种单分子探针，分析、推测某些蛋白分子对特异的GTPase的GEF或GAP活性, 从而简化对现有的待测蛋白分子的鉴定方法。