KiSS1/GPR54系统: 高催乳素血症所致内分泌功能紊乱的一条新的作用途径？

The hyperprolactinemia is an endocrine disease characterized by abnormal increase of serum prolactin, which comes from a number of causes. however, the actional pathway of endocrine dysfunction is not clear. Recently, the study has shown that the prolactin receptor was highly expressed KiSS1 neurons in the hypothalamus (and its receptor GPR54, forming KiSS1/GPR54 system involved in the regulation of hypothalamic-pituitary-gonadal axis). Our previous works found that serum kisspeptins level significantly decreased in the hyperprolactinemia. Therefore, we speculated that the KiSS1/GPR54 system was involved in the regulation of hyperprolactinemia endocrine dysfunction. It The co-localization of PRL receptor and KiSS1 cells is determined by immunohistochemical double labeling method; By the hyperprolactinemia models and patients, and RNA interference technology, it detected the changes of KiSS1/GPR54 system, serum hormone and their relevance in the hyperprolactinemia; It will be observed whether prolactin inhibitor, KiSS agonists could reverse the endocrine dysfunction and related signaling pathways of hyperprolactinemia.It aimed to explore the effect and mechnism of the KiSS1/GPR54 system in the endocrine dysfunction of hyperprolactinemia, and to provide new ideas for the better treatment of the clinical hyperprolactinemia.

高催乳素血症是指各种原因导致血清催乳素异常升高为主要表现一类内分泌疾病，然而有关其导致内分泌功能紊乱的作用途径未明。最近，有研究显示催乳素受体高度表达于下丘脑KiSS1神经元（与其受体GPR54组成KiSS1/GPR54系统, 参与下丘脑-垂体-性腺轴调节）。我们前期研究发现:高催乳素血症患者血清kisspeptin水平明显下降。故推测KiSS1/GPR54系统参与高催乳素血症所致内分泌功能紊乱调节。本课题拟通过免疫双标法确定PRL受体与KiSS1共定位关系;通过高催乳素血症模型和患者及RNA 干扰技术明确高催乳素血症状态下KiSS1/GPR54系统、血清激素变化及其相关性。通过给予催乳素抑制剂、KiSS1激动剂等方法，观察是否可以逆转其所致内分泌紊乱及相关信号通路。旨在探讨KiSS1/GPR54系统在高催乳素血症所致内分泌功能紊乱作用及其机制，为临床高催乳素血症疾病更好治疗提供新的思维。

高催乳素血症是指各种原因导致血清催乳素异常升高为主要表现的一类内分泌疾病，然而有关其导致内分泌功能紊乱的作用途径未明。最近，有研究显示催乳素受体高度表达于下丘脑KiSS1神经元，且我们前期研究发现：高催乳素血症患者血清kisspeptin水平明显下降，故推测KiSS1/GPR54系统可能参与高催乳素血症所致内分泌功能紊乱的调节。通过构建在体和离体的高泌乳素血症（HPRL）模型，观察HPRL对大鼠卵巢黄体组织结构和其内分泌功能的影响、Kiss1和GPR54表达水平的变化及其相关的作用机制。研究结果显示：间接免疫荧光染色结果表明，未成年大鼠卵巢组织黄体化后，Kiss1蛋白和PRLR蛋白共表达于卵巢黄体组织细胞。HPRL对大鼠卵巢重量、黄体的数量及其面积没有明显的影响。然而，放射免疫结果显示HPRL大鼠血清雌二醇和孕酮水平明显下降。HPRL大鼠卵巢黄体组织Kiss1、 GPR54 mRNA和蛋白表达水平均明显下降。在离体黄体细胞培养中，高浓度PRL对大鼠黄体细胞雌二醇与孕酮分泌具有显著的抑制作用，然而PRL+kisspeptin-10能显著增加孕酮的分泌水平。同时，类固醇激素合成几个关键酶（StAR, 3β-HSD, CYP11A）mRNA表达水平均具有明显的抑制作用；相比PRL组，黄体细胞液中加入PRL+ kisspeptin-10能显著增加几个关键酶mRNA水平的表达。酶联免疫分析结果显示，与对照组相比，高浓度PRL明显可增加hCG诱导的大鼠黄体细胞PGF2α分泌水平，而kisspeptin-10可明显降低其对黄体细胞PGF2α水平的促进作用；并且，高浓度PRL可明显抑制hCG诱导的大鼠黄体细胞PGE2的分泌，kisspeptin-10可明显改善其对黄体细胞PGE2分泌水平的抑制作用。免疫印迹检测结果显示，与对照组相比，高浓度PRL明显可减少Erk1/2的磷酸化；相比PRL组，黄体细胞液中加入PRL+ kisspeptin-10能显著增加Erk1/2的磷酸化。此研究将有助于探讨KiSS1/GPR54系统在高催乳素血症所致内分泌功能紊乱的作用及其机制，为临床高催乳素血症疾病更好治疗提供新的思维。