溶纤维素粘细菌降解纤维素的多酶复合体解析

溶纤维素粘细菌是目前已知降解纤维素活力最强的菌群之一。但其纤维素降解特性的研究一直未见深入报道。我们前期的研究结果显示，溶纤维素粘细菌的纤维素类物质降解酶系在细胞表面组织形成高效降解纤维素类物质的多酶复合体。本申请拟解析该复合体的构成。一方面，通过制备多酶复合体，2D电泳分离复合体蛋白亚基，进行N-端测序和肽段序列分析，从蛋白层面上解析多酶复合体的构成组分及功能。另一方面，拟构建基因组文库，通过活性筛选、多重杂交或PCR筛选(探针引物基础为蛋白N-端和肽段序列以及相关酶组分的保守域等)，获得多酶复合体相关基因或基因簇，测序分析，从基因层面上解析其构成、功能和组织形式。综合结果将阐明溶纤维粘细菌多酶复合体的构成和组织方式，为深入研究复合体中分子的合成与组装提供线索，对纤维素类物质的生物降解理论和应用提供新的素材。