罗仙子抗动脉粥样硬化的物质基础及其作用机制研究

Traditional chinese medicine Musca domestica is rich in active substances related to inflammatory and immunoloregulation. Inflammatory and immunoloregulation play important roles in Atherosclerosis (AS). These imply that the active substances in Musca domestica may have the function of anti-AS through immunoloregulation.Our previous studies confirmed this speculation and showed that protein extract of Musca domestica could significantly inhibit AS progression. However, The material base of Musca domestica responsible for the fucntion of anti-AS and the underlying mechanism remain to be explored. In this project, firstly we try to isolate the effective compounds from protein extract by GFC and RP-HPLC and screening through LPS / macrophage platform. Then the material basis of Musca domestica responsible for anti-AS will be identified. Finally the underlying mechanism will be clarified through in vivo and in vitro experiments. We expect to provide new ideas and scientific basis for the therapy of AS based on Musca domestica.

传统中药材罗仙子体内富含与炎症免疫调控相关的活性物质，而炎症免疫在动脉粥样硬化（AS）形成中发挥了重要的作用，提示罗仙子体内的活性物质可能具有通过免疫调控发挥抗AS的作用。我们前期发现罗仙子富含蛋白的提取物具有良好的抗鼠AS作用，那么，罗仙子体内抗AS的物质基础是什么？其具体的机制如何？本项目拟利用葡聚糖过滤凝胶色谱、反向高效液相色谱技术和脂多糖（LPS）/巨噬细胞平台对蛋白提取物进一步分离和筛选，寻找出单一或最少成分的等效药效组分，明确罗仙子抗AS的物质基础；在此基础上，从炎症免疫调控的角度，以C57BL和apoE-/-小鼠AS模型为实验对象，利用LPS/巨噬细胞、TNFα/人脐静脉内皮细胞ECV304、巨噬细胞/内皮细胞分隔及共培养3个平台，在整体、细胞和分子水平探讨该组分调控AS的机理。项目的实施将为从传统中药罗仙子中开发出新的抗AS药物提供新的思路和科学依据。

要由瘀毒阻络形成，是一个慢性炎症的过程。我们前期发现：罗仙子富含抗菌肽、溶菌酶等多种生物活性成分，并初步证实罗仙子具有抗动脉粥样硬化的作用，但具体作用机制和物质基础尚不明确。基于此，课题组开展了罗仙子抗动脉粥样硬化的物质基础及其作用机制的研究。.课题组采用葡聚糖过滤凝胶色谱方法成分分离出分子量大于60KD、30-60KD及小于30KD的不同多肽部位，利用LPS/巨噬细胞平台筛选出抗炎效果的组分为分子量小于30KD的部位；为进一步明确该部位的组成，课题组建立了活性部位多肽的分离方法及氨基酸指纹图谱【已申报专利2项，其中1项获授权，并在Advanced Materials Research发表EI收录论文1篇】；抗动脉粥样硬化功效与作用机制研究方面，以C56BL和apoE敲除动脉粥样硬化模型小鼠为模型，发现：罗仙子中小于30KD多肽部位能够有效抑制上述两种动物的动脉粥样硬化，改善模型动物血脂水平，减少血清中炎症因子的表达【相关研究结果发表在SCI收录期刊Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine上】；调节巨噬细胞/血管内皮细胞/血管平滑肌细胞之间的相互作用是罗仙子小于30KD的活性多肽抗动脉粥样硬化的作用机制【相关研究结果分别发表在SCI收录期刊Cellular Physiology and Biochemistry 和Pharmaceutical Biology】。在此基础上，对罗仙子安全性进行评价，结果表明其安全性良好【相关结果发表在SCI收录期刊Food and Chemical Toxicology】。项目的实施初步明确了罗仙子抗动脉粥样硬化的物质基础及作用机制，为罗仙子开发为抗动脉粥样硬化的药物提供了一定的理论和实验基础，同时也拓宽并丰富了罗仙子的应用范围与途径。. 项目实施过程中较好的完成了申报书中的各项指标，个别指标超额完成。迄今，共发表论文17篇，其中SCI收录4篇、EI收录2篇；申报专利4项，其中授权3项，研究成果获得2013年广东科学技术奖二等奖1项；人才培养：培养硕士研究生3名、博士研究生1名，项目组成员中有1人晋升高级职称、4人晋升副高级职称。