甾体皂苷PSI抗卵巢癌的机制研究

卵巢癌的死亡率在妇科肿瘤中居第一位，常规化疗药物副作用较大，开发新的天然抗癌药物对治疗卵巢癌十分重要。从七叶一枝花中提取的甾体皂苷PSI有明确的抗癌活性和较小的毒副作用，但PSI的抗癌作用机制尚未明确。根据前期实验，我们推测PSI可能通过抑制NF-?B的表达来抑制VEGF的表达，从而影响肿瘤血管的生长，发挥抗卵巢癌作用。故本研究拟以PSI为对象，分别干预卵巢癌细胞株和卵巢癌移植瘤裸鼠模型，检测NF-?B信号通路多种蛋白的表达，特别是VEGF的改变；以此揭示通过PSI对NF-?B信号通路的影响，从而抑制肿瘤血管生长，抗卵巢癌的作用机制。

本课题以七叶一枝花中提取的甾体皂苷PSI为研究对象，分别干预卵巢癌细胞株和卵巢癌移植瘤裸鼠模型，深入研究了NF-KB信号通路上游NO, microRNA-7, Pak1, NF-KB以及通路下游相关蛋白VEGF, KDR表达的改变，并揭示了PSI通过对NF-KB信号通路的影响来抑制肿瘤血管生长，从而抗卵巢癌的作用机制，为天然药物重楼有效成分的研发和卵巢癌的治疗提供新选择和靶点。主要取得以下学术成绩：.(1)改进提取工艺，从七叶一枝花中高效提取并纯化甾体皂苷化合物PSI及其他衍生物，为今后PSI及其他衍生物的相关研究奠定良好的基础。.(2)通过检测PSI干预后卵巢癌细胞以及移植瘤的NO、microRNA-7, Pak1、 NF-KB以及下游通路相关蛋白VEGF、KDR等表达的改变，首次将PSI抑制卵巢癌生长的作用机制与NF-KB和VEGF联系在一起。.(3)探索PSI通过对NF-KB信号通路的影响来抑制VEGF的表达，从而抑制卵巢癌生长的机制。率先揭示PSI 对NF-KB启动子和转录活性的影响，建立PSI抑制卵巢癌血管生长的NF-KB-VEGF信号通路。.(4)构建PBabe-IKBαM质粒，并转染至卵巢癌细胞株，从而构建了SKOV3-IKBαM和HEY-IKBαM细胞株；构建表达红色荧光的DsRed2-IKBαM质粒，并转染至卵巢癌细胞株，从而构建了MA148-IKBαM和MA148-DsRed2-IKBαM 细胞株；然后利用上述细胞株，成功构建了移植瘤裸鼠模型 SKOV3-IKBαM和HEY-IKBαM、MA148-DsRed2和MA148-DsRed2-IKBαM。综上，为今后研究卵巢癌和NF-KB信号通路提供了很好的体内、体外研究模型。.(5)完成PSI对卵巢癌干预的体内和体外抗瘤实验，特别是依靠建立的可视裸鼠移植瘤模型，重点研究了PSI对血管生成、肿瘤侵袭和转移的影响，为今后的深入研究奠定良好的基础。.总之，在该项目的资助下，本课题组通过3年的工作，在国际肿瘤学和妇产科学主流杂志上共发表SCI论文2篇，国内核心期刊论文1篇。同时协助培养博士生1名。