肠道病毒71型3A蛋白拮抗RNAi抗病毒免疫机制的研究

Human enterovirus 71 (EV71) is the major causative pathogen for hand-foot-and mouth disease and 3A is highly conserved among enteroviruses. Our published data showed that EV71 3A is a virus encoded suppressor of RNAi (VSR), which can suppress RNAi immunity in mammals. Moreover, our following study indicate that EV71 3A contains another mechanism to suppress RNAi and this unidentified mechanism functions through 3A interaction with some host proteins involved in the RNAi pathway. In this project, we aim to screen and identify the host factors that interact with EV71 3A and investigate the mechanism of 3A suppressing RNAi through inhibiting the functions of host factors involved in the RNAi pathway. Moreover, we will uncover the interrelationship between the mechanisms of 3A suppressing RNAi through binding to dsRNA as previously reported by us and binding to host factors. After that, we will discover the detailed mechanism of EV71 evading RNAi immunity in mammals. The accomplishment of this project will significantly deepen our understanding to the mechanisms of RNAi immunity and virus evading RNAi immunity, and also provide the novel targets (VSR) for anti-EV71 and other enteroviruses.

肠道病毒71型（EV71）是引发婴幼儿手足口病的主要病原。3A是肠道病毒中保守的非结构蛋白。申请人已发表的研究表明EV71 3A是一种RNA干扰（RNAi）抑制因子（VSR）。在哺乳动物中，3A能够通过与病毒dsRNA结合来拮抗宿主RNAi抗病毒免疫。我们前期的研究进一步发现，3A能与RNAi通路中多种宿主蛋白发生相互作用，这就表明了3A能够在RNA与蛋白水平上发挥多重抑制作用。据此，本项目将继续筛选鉴定与3A相互作用并参与RNAi通路调控的宿主蛋白，深入研究3A在蛋白水平拮抗RNAi的分子机制，比较3A在蛋白水平与已报道的3A在RNA水平拮抗RNAi机制之间的关系，评价RNAi与VSR在EV71感染过程中所起的作用，最终确定EV71逃逸RNAi免疫的具体机制。本项目在RNAi免疫及其病毒逃逸机制上具有重要的理论价值，同时为针对以EV71为代表的肠道病毒的抗病毒疗法提供新的靶点及理论基

肠道病毒71型（EV71）是引发婴幼儿手足口病的主要病原。3A是肠道病毒中保守的非结构蛋白，申请人之前的研究发现3A具有RNA干扰（RNAi）抑制子（VSR）的功能。本项目通过深入研究，发现了3A在多个层面抑制RNAi免疫通路，揭示了RNAi免疫的作用机制。此外，我们揭示了哺乳动物RNAi免疫的生理学作用：1）RNAi免疫在神经前体细胞中抵御寨卡病毒感染；2）虫媒黄病毒在媒介昆虫与宿主哺乳动物中的致病差异与其激发与逃逸RNAi免疫相关；3）多种重要病毒均编码VSR，其激发及逃逸RNAi免疫相关与病毒致病性密切相关。我们进一步建立了靶向病毒VSR的抗病毒药物研发新策略，并以肠道病毒为例，研发了多种具有高活性的广谱抗肠道病毒药物。此外，新冠疫情爆发后，主持人积极响应国家需求开展科技抗疫工作，并取得了一系列进展。在本项目支持下，主持人以第一或通讯（含共同）在领域内顶尖或权威期刊发表论文 11篇，包括Immunity（2篇）、Cell Research、National Science Review（2篇）、Science Advances、JCI Insight.、J Virol、Sci. China Life Sci.、Virol Sin、Viruses；其中1篇被F1000推荐，2篇被选为期刊封面文章。获4项国家发明专利授权。主持人获国家优秀青年科学基金项目（2022年）。本项目的完成揭示了RNAi免疫及病毒逃逸机制的重要生理作用，同时为针对以EV71为代表的肠道病毒的抗病毒疗法提供新的靶点及理论基础。