鹿茸对脊髓神经元细胞凋亡保护作用的药效作用基础及机制研究

脊髓损伤目前临床发病呈上升趋势，早期干预继发损伤的发生和发展，寻找合适的神经保护药物是目前重要的治疗策略。鹿茸为吉林省道地药材，现代药理研究证明，鹿茸中的多肽提取物对中枢神经系统损伤修复作用显著，表现出对明显促进中枢神经细胞增殖活性。课题组前期工作证实鹿茸多肽具有抑制辐射诱导脊髓神经细胞凋亡的作用，为进一步明确其药效作用基础及机制，本课题拟对鹿茸中提取的活性多肽混合物进行分离筛选，获得抑制脊髓神经元细胞凋亡作用的多肽单体，并采用酵母双杂交技术确定其在分子识别中的细胞信号转导受体，结合蛋白质组学手段，建立鹿茸活性分子作用后的特异蛋白表达谱，在分子水平上对其作用机制作出初步探索，为鹿茸的生精补髓的药效作用深入研究提供科学依据。

脊髓损伤目前临床发病呈上升趋势，早期干预继发损伤的发生和发展，寻找合适的神经保护药物是目前重要的治疗策略。鹿茸为吉林省道地药材，现代药理研究证明，鹿茸中的多肽成分对中枢神经系统损伤修复作用显著。本课题组对梅花鹿鹿茸进行全转录组测序，首次成功构建了鹿茸全转录组数据库，从而系统全面的筛选并表达具有相关生物学活性的蛋白，应用转录组测序技术、荧光定量PCR技术及原位杂交技术，从RNA水平检测了胸腺素基因的表达丰度、表达变化趋势及组织定位情况，首次证实了胸腺素基因在鹿茸中的存在，为进一步研究梅花鹿胸腺素基因功能奠定基础；运用生物信息学、分子生物学和细胞生物学手段，成功的获得了单一、大量、有效的鹿茸重组多肽thymosin β4；应用流式细胞术、免疫组化手段首次证实thymosin β4对于脊髓神经元细胞的保护是通过调控凋亡基因的表达，使Bcl-2表达上调，caspase-3和Bax表达下调来实现的，进一步阐明了鹿茸多肽单体thymosin β4促进脊髓损伤修复的机制，为鹿茸生精补髓药效的深入研究提供科学依据。