HBV背景的男性肝癌多于女性：iTRAQ定量蛋白质组学分析

广西是乙型肝炎病毒（HBV）为背景的原发性肝癌高发区，男性发病率明显高于女性，女性肝癌预后明显优于男性。平均乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）携带率明显高于全国平均水平。本项目拟针对男女肝癌发病率的差异，采用HBV背景的男性和女性的肝炎组织、肝硬化组织和肝癌组织为研究对象，并以正常肝组织为对照，运用定量蛋白质组学iTRAQ技术构建HBV背景的男性和女性在肝癌发生发展过程中的差异蛋白表达谱，筛选并验证由于性别差异所导致的与肝癌发生发展相关的差异分子。联合血清性激素及其组织中受体水平的测定，通过生物信息学方法解析差异表达分子与性激素水平相互联系及其可能的调控网络。本项目以性激素及其受体水平与肝癌发生发展的相互作用为切入点，旨在揭示HBV背景的男女人群肝癌发生发展过程中的差异的分子基础及可能的调控网络，为原发性肝癌的发病机制研究提供新的理论依据和实验基础。

中国男性肝癌的年龄标准化发病率为37.9/10 万，女性为14.2/10 万。已有研究报道性别差异与肝癌的发生及预后密切相关，但其深入的分子机制尚不明确。本文的目的在于筛查男女肝癌发病过程中差异表达的关键分子并探讨其可能作用机制。应用定量蛋白质组学iTRAQ技术筛查在HBV背景男女肝癌发病过程中差异表达的蛋白质分子，采用基因干扰跟过表达和细胞功能学实验探讨关键蛋白质分子的作用机制。我们应用定量蛋白质组学技术筛选出73个HBV相关肝癌男女性别差异的蛋白质，其中上调的蛋白有16个，下调的蛋白有57个；经RT-PCR和western blot验证取得一致结果。研究发现Y染色体编码的睾丸特异性蛋白1（TSPY1)是男性肝癌中特异高表达的蛋白质分子，过表达的TSPY1可以促进肝癌Huh7和SMCC 7721细胞增殖、侵袭和软琼脂糖克隆形成能力，沉默MHCC97H细胞TSPY1表达可降低细胞增殖，侵袭能力；并且TSPY1在肝癌细胞中的表达与细胞的转移潜能成正相关。研究还发现TSPY1在肝癌组织和肝癌细胞中的表达水平与雄激素受体（AR）表达水平呈正相关；而且TSPY1的表达上调和下调会引起AR水平相应的高或低表达。TSPY1是 HBV背景肝癌男女性别差异的重要分子，其可能通过雄激素及其受体途径参与男性肝癌的发生并为男性肝癌的一个新的标志物。