可视化纳米分析体系的构建及食源性致病菌现场快速检测技术研究

The incidence of foodborne diseases has increased over the years and resulted in major public health problem in China. Staphylococcus aureus and Listeria monocytogenes are the most common pathogens causing of foodborne disease and it is important to detect the two foodborne pathogens to provide safe food supply and to prevent foodborne diseases. The conventional methods used to detect foodborne pathogen are time consuming and laborious especially limited to the site detection. In this proposal, we exploit to develop a visual nanoanalysis system based on nano- biosensor technology as rapid detection method. The research content mainly includes: ① Preparation and Purification of IgY egg yolk antibodies;② Assembled two types of bacteria "splitter" based on immunized magnetic nanoparticles and enzyme-labeled antibody ;③ Construction of two types of bacteria visualized "detector" by gold nanoparticles;④ Quantitative and qualitative evaluation of the target foodborne pathogens. In general, the rapid detection method will be time-efficient, sensitive, specific and labor-saving. The development of the new method would be vital in prevention and treatment of foodborne diseases.

近年来，食源性致病菌引发的食品安全事件已成为我国日益严重的公共卫生问题，金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌作为两种最常见的致病菌，严重危害人民身体健康和社会经济发展。目前针对这两种致病菌的检测技术均存在着实验技术操作繁琐和所需设备价格昂贵等局限性，无法满足当前食品卫生现场快速检测的实际需要。本研究以纳米技术和生物技术为载体拟构建集富集分离于一体的新型纳米可视化检测体系，突破食源性致病菌现场快速检测的技术瓶颈。主要研究内容包括：①制备、纯化两种目标菌的卵黄抗体IgY；②采用免疫磁性纳米粒子和酶标记抗体构建两种目标菌快速高效的“分离器”；③以金纳米粒子为基体构建两种目标菌的可视化“检测器”；④待检样品中两种目标菌的定性、定量检测及效果评价。本研究的目的是设计制备具有我国自主知识产权和广泛应用前景的检测试剂盒，借助目视比色法和分光光度法实现对两种目标菌实时同步、定性、定量现场快速检测。

近年来，食源性致病菌引发的食品安全事件已成为我国日益严重的公共卫生问题，金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌作为两种最常见的致病菌，严重危害人民身体健康和社会经济发展。目前针对这两种致病菌的检测技术均存在着实验技术操作繁琐和所需设备价格昂贵等局限性，无法满足当前食品卫生现场快速检测的实际需要。本研究以纳米技术和生物技术为载体拟构建集富集分离于一体的新型纳米可视化检测体系，突破食源性致病菌现场快速检测的技术瓶颈。主要研究内容包括：①制备、纯化两种目标菌的卵黄抗体IgY；②免疫磁性纳米探针的制备及表征；③以金纳米粒子为基体构建两种目标菌的可视化“检测器”；④待检样品中两种目标菌的定性、定量检测及效果评价。在各自最优条件下，吸光度值与金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌的浓度在10 ~ 106 cfu mL-1范围内呈线性相关。同时，该传感系统能产生生动色彩响应，裸眼检测限低至10 cfu mL-1。在分析未预富集的加标食品样品时，金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌各自的回收率分别在97.22 ~ 99.62%和91.2 ~ 106.4%之间。在我们看来，它有望应用于细菌的快速检测仪和现场快速检测。本研究的目的是设计制备具有我国自主知识产权和广泛应用前景的检测试剂盒，借助目视比色法和分光光度法实现对两种目标菌实时同步、定性、定量现场快速检测。