miR-193a-3p调控的长非编码RNA在膀胱癌多药耐受的作用和机制研究

。The multidrug resistance prevencts curative cancer chemotherapy and demands an intensive investigation. Our previous studies have shown that the DNA methylation regulated miR-193a-3p represses the expression of the following three genes：SRSF2, PLAU and HIC2, affects multiple signaling pathways and promotes both the in vivo tumor growth and multi-drug chemo-resistance of both liver and bladder cancer. LncRNA is a loosely defined group of the non-coding RNAs with a diverse but crucial role in various biological and pathological conditions, including the multi-chemoresistance of cancer. Similar to the protein coding gene, its expression is under the negative regulation of miR, in addition to the transcription regulation. Via a comparative LncRNA expression profiling of a multi-chemosensitive (5637) and a resistant (H-bc) cell lines, several dozens of the differentially expressed LncRNA have been identified. Among six bioinformatically predicted miR-193a-3p's targetsm express in a negative pattern of the miR-193a-3p,the expected expression pattern of lnc-SMAD3-1，lnc-FAM54B-1 and lnc-AKIP1-3 was confirmed by qRT-PCR. For the novel mechanistic insights, we will perform a systematic study of this three LncRNAs at the molecular, cellular and the tumor/xenograft/nude mice levels, in the context of the multi-chemoresistance of bladder cancer..

多药耐受是临床肿瘤化疗低效的根本原因，也是肿瘤的基础和转化医学研究的重要内容之一。我们前期工作表明受甲基化状态调控的miR-193a-3p通过下调PLAU，HIC2及SRSF2的表达，影响多个信号传导通路的活性来促进肝癌和膀胱癌的肿瘤生长和化疗耐受。长非编码RNA（LncRNA）以多种作用机制调控基因的表达，与蛋白编码基因类似，LncRNA的表达可在转录后水平受到miR的负调。通过LncRNA比较组学分析，发现6个（生物信息学预期的）可能受miR-193a-3p的调控LncRNA基因。其中lnc-SMAD3-1，lnc-FAM54B-1和lnc-AKIP1-3基因的表达得到qRT-PCR分析的肯定。为更深入的机制理解，我们将从这3个LncRNA基因的视角，开展分子、细胞和裸鼠移植瘤模型水平上的系统研究。

临床常见的多药化疗耐受是导致肿瘤化疗无效的主要根源。我们前期工作表明受甲基化状态调控的 miR-193a-3p 对肝癌和膀胱癌的肿瘤生长和化疗耐受性有促进作用，并确认miR-193a-3p 通过下调PLAU，HIC2 及SRSF2 的表达，影响多个信号传导通路的活性来产生这些表型效应。长非编码RNA（LncRNA）以多种作用机制调控基因的表达，广泛包括肿瘤在内的多种疾病的发生及发展。与蛋白编码基因类似，LncRNA的表达可在转录后水平受到miR的负调。 .本项目中，我们比较了7株膀胱癌细胞系的化疗耐受谱式和miR-193a的表达水平，发现miR-193a还可以通过抑制LOXL4, PSEN1, HOXC9和ING5这四个编码基因的表达，影响氧化应激反应、DNA损伤应答、Myc/max和NF-κB通路活性，促进膀胱癌细胞的化疗耐受性。继而对这些膀胱癌细胞系进行DNA甲基化芯片和LncRNA array芯片检测，发现了一批表达与miR-193a水平负相关，且差异性表达的LncRNA基因。对生物信息学筛选出的11个候选LncRNA基因进行1，瞬时转染体系和2， 稳转细胞体系中的逆转miR-193a后的表达验证， 6个值得进一步研究的目的基因。随后对这些LncRNA的核质分部开展分析，以期为对这些LncRNA在miR-193a介导的膀胱癌化疗耐受中的作用及其机制研究中打下基础。然而此方面努力没有达到预期结果。.在此项目进行中，朱景德主办了八次高水平的学术会议（附件一），并主编了题为“表观遗传学与精准医学”的专著ISBN 978-7-313-18411-5（该专著获得了2018年北京国际书展的优秀专业书的金奖）。