长链非编码RNA HULC在细胞凋亡中的作用和机制

HULC is up-regulated in hepatocellular carcinoma(HCC), which is a long noncoding RNA. In the pilot study, loss-of-function experiments revealed that HULC inhibition sensitized cancer cells to diverse apoptotic stimuli, including nutrient starvation and chemotherapeutic treatment. These data suggested that the up-regulation of HULC in HCC cells might decline the apoptosis. With these findings as background, we plan: to verify the regulation of HULC on apoptosis of HCC cells via detecting the apoptotic rate in vitro and in vivo; to identify the target genes and the pathway through which HULC modulates apoptosis. These results will expand our knowledge on the implication of HULC in the apoptosis of HCC cells, and provide novel target for HCC therapy.

HULC是原发性肝癌中表达显著上调的长链非编码RNA。前期研究中，我们发现沉默细胞内源HULC 的表达，能明显促进肿瘤细胞对血清饥饿和化疗药的敏感性，促进细胞凋亡。提示肿瘤中HULC 的上调可能促进肿瘤细胞在低营养的微环境中存活和耐受化疗药物的治疗。以此为基础，我们拟开展以下工作：通过体外细胞凋亡检测实验，并结合裸鼠体内模型，验证HULC 对肝癌细胞凋亡的调控作用；鉴定介导HULC 调控凋亡作用的靶基因及信号网络。研究结果将加深人们对于HULC 调控通路及其在肝癌发生发展中作用的认识，并为肝癌治疗提供新的靶标。

HULC是原发性肝癌中表达显著上调的长链非编码RNA，它在肝癌细胞凋亡中的作用尚未完全清楚。本项目首先建立了HULC过表达的载体、设计了针对HULC的siRNA并进行了验证。以此为基础，我们分析了HULC的表达及其可能调控凋亡的分子机制，发现沉默内源HULC的表达可以促进肿瘤细胞对血清饥饿和化疗药物的敏感性，促进细胞凋亡；而过表达HULC可以促进肿瘤细胞在低营养的微环境中的存活和对化疗药物的耐受。初步功能研究揭示抑制细胞内源HULCA表达可以提高GRP78和cleaved-parp-1的表达水平，可以促进cleaved-caspase3的表达，线粒体膜电位的降低，但对BAX等常见凋亡下游分子影响较小。同时，我们探讨了HULC在肝癌中上调的机制，发现在肝癌组织中HULC并未发生DNA水平的扩增，而EGF可以上调HULC的表达。进一步，我们采用生物信息学方法分析TCGA芯片数据研究HULC可能调控的信号通路及其相关分子。本研究结果提示：非编码RNA的失调在肿瘤中发挥重要作用，它们是肿瘤防治的潜在新靶点。