筋骨草和金疮小草中抑制小胶质细胞活化作用活性成分的发现及构效关系的研究

It is a good method that obtain the bioactive constitutents with the inhibitory effects on microglial activation from natural plants for treament of neurodegenerative diseases like AD and PD. In this way, Ajuga. ciliata and A. decumbens in genus Ajuga may have big value to study for their rich source in China, nice treatment of inflammation, and full of active micromolecule components. In our previous work, great amount of neo-clerodane diterpenes have been isolated from the whole plants of A. ciliata and A. decumbens, and some of these compounds were assessed by LPS-activated murine microglial BV-2 cells built by us to get 12 bioactive constitutents. Based on this, we project to utilize UPLC/Q-TOF-MS and the other instruments to analyze MS and NMR regularities of compounds, which have been identified by us, and use various kinds of modern chromatographic methods to continue isolating constituents, including micro constituents. Further more, we will give activity tests for all the compounds and study their Structure-Activity relationships to gain more significant ones. The cytotoxicity, barrier permeability, pharmacodynamics, and further mechanism of the compounds will also be studied. All of our research provide a new method and theory for utilizing undeveloped plant resources reasonably and sufficiently, and speeding up the discovery of the bioactive lead compounds isolated from them. It also established material basis for treament of neurodegenerative diseases like AD and PD from natural plants.

从植物中寻找具有抑制小胶质细胞活化作用的活性成分是研究和开发治疗AD、PD等神经退行性疾病药物的途径之一。筋骨草属植物筋骨草和金疮小草，资源丰富、抗炎作用明显、小分子活性成分较多，开发潜力巨大。前期工作中，从金疮小草和筋骨草中分离得到了大量的新克罗烷型二萜类化合物，并利用建立的LPS诱导小胶质细胞BV-2异常活化的筛选平台对部分化合物进行筛选，共发现12个活性较强的成分。在此基础上，拟采用UPLC/Q-TOF-MS等仪器分析已鉴定化合物的MS、NMR 规律，并利用现代色谱手段，继续分离鉴定植物中的各类成分，包括微量成分，检测这些成分的活性并研究构效关系，寻找活性更高的化合物，并初步研究体外细胞毒性、血脑屏障透过率、药效学及作用机制，为充分合理利用我国尚待开发的植物资源，从中快速发现活性先导化合物提供新的方法和理论依据，更为从植物中开发防治AD、PD等神经退行性疾病的创新药物奠定物质基础。

从植物中寻找具有抑制小胶质细胞活化作用的活性成分是研究和开发治疗 AD、 PD 等神经退行性疾病药物的途径之一。前期工作中发现，筋骨草和金疮小草中含有丰富的新克罗烷型二萜类成分，并具有抑制LPS 诱导BV-2小胶质细胞的活化作用。在此的基础上，对筋骨草和金疮小草中已鉴定的新克罗烷型二萜类化合物的 MS、NMR 规律进行总结分析，建立了高效快速“化学识别”方法，并利用现代色谱手段及ECD等先进的结构解析方法，从两种植物中共分离鉴定出65个新克罗烷型二萜类化合物，其中从项目资助开始分离得到新化合物14个；同时对二氯甲烷层及正丁醇层中其他类型的化合物进行了分离鉴别，共得到30个已知的黄酮、环烯醚萜苷等化合物及一个环戊烯酮类新化合物；利用建立的小胶质细胞BV-2异常活化的筛选平台对二萜类化合物进行了活性测试及神经细胞毒性的考察，并对它们的构效关系进行研究，初步推测出高效低毒的活性化合物。除此之外，我们还利用三重四级杆质谱仪,建立了金疮小草植物中主要的二萜类成分UPLC-MS/MS含量测定方法，对不同产地的不同提取方法得到的供试品中二萜类化合物含量的变化进行了探讨。以上研究内容为充分合理利用我国尚待开发的植物资源，从中快速发现活性先导化合物提供新的方法和理论依据，更为从植物中开发防治 AD、PD 等神经退行性疾病的创新药物奠定物质基础。