龙眼脑苷脂对脑神经小胶质细胞过度活化的抑制作用及构效机制

Longan has been used to improve the learning and memory abilities in Chinese traditional medicine for a long time. However, little is known about the scientific basis of longan pulp in learning and memory effect. Our previous study found that longan pulp contains rich cerebrosides and its extract can significantly improve learning and memory ability of mice. The present study intends to optimize and establish new separation and preparation technologies, identify the chemical structure of cerebrosides and absolute configuration of novel ones; compare their inhibition differences (cytokine expression levels) of LPS-induced microglia excessive activation; clarify their main active monomer compounds; discuss the phosphorylation of each subfamily, ERK1/2 nuclear translocation and the binding ability of transcription factor activator protein-1 and DNA based on MAPK signaling pathway; explain their protective molecular mechanisms of learning and memory function; provide its structure-activity relationships in combination with their chemical structures. The results provide a theoretical basis for longan deep processing and new ideas for characterization and mechanism of action of plant-derived cerebroside.

我国民间和传统中医一直认为龙眼（桂圆）具有益智、改善记忆作用，但其物质基础与作用尚不清楚。项目前期研究发现龙眼果肉中含有较丰富脑苷脂类物质，且其提取物能显著改善小鼠的学习记忆能力，本项目拟优化建立脑苷脂类化合物的分离制备新技术和新方法，鉴定各脑苷脂化合物的化学结构及绝对构型，发现结构新颖单体化合物；比较龙眼果肉脑苷脂各级分对LPS诱导的脑神经小胶质细胞过度活化抑制作用差异（炎性细胞因子表达水平），明确其主活性单体化合物；围绕MAPK信号通路探讨其对小胶质细胞中促分裂原活化蛋白激酶各亚族磷酸化、ERK1/2的核移位情况以及转录因子激活蛋白-1的DNA结合能力的影响，阐释其保护学习记忆功能的分子机制；并结合脑苷脂类单体化合物的化学结构特点，探明其构效关系。研究结果可为龙眼精深加工提供理论依据，为植物来源的脑苷脂的化学结构表征及作用机制研究提供新思路。

我国民间和传统中医一直认为龙眼具有改善学习记忆的功效，但其相应的物质基础及药效机制尚不明确。氧化应激在学习记忆障碍发病机制中也起着重要的作用。本项目以龙眼脂溶性和水溶性成分的抗氧化能力为活性跟踪指标，比较分析了不同干制方式下龙眼中磷脂、挥发性成分、酚类成分的抗氧化活性差异，确定主活性级分；采用现代波谱技术表征主活性级分的化学结构；通过明暗箱模型探讨了脂提取物和水提取物对东莨菪碱致衰小鼠学习记忆行为的改善效果；分析其对血清抗氧化系统SOD、GSH-Px活性及MDA及脑内胆碱能系统ChAT和AChE的影响，从抗氧化分子水平上探讨了龙眼脂溶性和水溶性成分改善学习记忆功能的发生机制。项目研究后期，由于工作变动，科研方向有所调整，研究了以复方升降散为主的抗病毒中药的药效机制和物质基础。研究结果发现升降散具有光谱的抗流感病毒作用，并存在一定的剂量依赖关系；升降散抗A/WSN/33（H1N1）病毒的IC50低于35μg/mL，在这个给药浓度下，保护PR8感染小鼠的存活率达到50%，且肺指数和病毒滴度较对照组有明显减轻；在2mg/ml时，对神经氨酸酶有一定的抑制作用；上调TNF-α和IFN-α，下调IL-2的表达量。初步探讨了升降散治疗流感病毒的药效机制，为升降散的进一步开发利用提供理论依据。.项目在执行过程中已发表论文3篇，其中SCI收录1篇; 投稿SCI论文2篇，其中1篇写结题报告之时进行小修。申请发明专利2项，培养研究生2名。