基于转录因子T-bet/GATA-3 mRNA表达探讨清肺通络法干预小儿MPP干咳调控机制研究

Pediatric mycoplasma pneumonia (MPP) is a common childhood community acquired pneumonia.Dry cough is outstanding after infection symptoms of MPP,which seriously influence children's physical and mental health and bring great medical economic burden.The modern medical science thinks the MPP dry cough is mainly airway hyperresponsiveness and chronic inflammation concurrent immune reaction process.We think that TCM pathogenesis key is stagnation of heat in the lung,Based on the research foundation, this topic through the detection of serum IFN-γ,IL - 4,Specific transcription factor T - bet/GATA - 3 mRNA and rat lung tissue, alveolar lavage fluid, etc.Our purpose is to clarify the curative effec foundation and provide evidence of Qingfei Tongluo method for the MPP dry cough, and to reveal the control mechanism and the internal relations of the related cell and key transcription factors .we should try to promote the clinical diagnosis and treatment level.

小儿支原体肺炎（MPP）是儿童常见社区获得性肺炎，干咳是感染后突出症状，严重影响儿童身心健康，并带来较大医疗经济负担。现代医学认为MPP干咳主要是气道高反应和慢性炎症并存的免疫反应过程。我们认为小儿MPP干咳中医病机关键是热郁肺络，基于前期研究基础，本课题通过检测血清中IFN-γ、IL-4、特异性转录因子T-bet/GATA-3 mRNA及大鼠肺组织、肺泡灌洗液等，阐明清肺通络法对MPP干咳的疗效基础，揭示其对相关细胞因子和关键转录因子的调控机制及其内在交互关系，为中医清肺通络法治疗MPP干咳提供证据支持，促进中医药临床诊疗水平。

小儿肺炎支原体肺炎是儿科常见社区获得性肺炎，干咳是感染后突出症状，严重影响儿童身心健康，并带来较大医疗经济负担。现代医学认为其干咳机制主要是气道高反应性和慢性炎症并存的免疫反应过程。本研究分为基础研究和临床研究两部分内容：其中，基础研究部分为动物实验，将实验动物随机分为对照组、中药组、西药组、中西合药组，每组12只。灌胃21天后处死，取肺泡灌洗液及肺组织，检测IL-4、IFN-γ及特异性转录因子GATA3/T-bet mRNA的表达，留取肺组织行病理学检测。通过实验证实（1）清肺通络法可通过恢复TH1/TH2的平衡，从而调节支原体肺炎大鼠模型的免疫机制，缓解气道高反应。（2）肺组织中与IL-4、IFN-γ表达相关的特异性GATA3 mRNA、T-bet mRNA的定量PCR检测，与血清和肺泡灌洗液中IL-4、IFN-γ检测值变化趋势相一致，从机制上明确了清肺通络法具有恢复TH1/TH2平衡的免疫调节作用。（3）清肺通络法可减轻支原体肺炎大鼠模型肺部慢性炎症。临床研究部分共收集符合纳入标准的患儿36例，采用随机数字表分为中药组、西药组和中西合药组，每组例数分别为13、11、12例。中药组予口服清肺通络复方；西药组予口服顺尔宁；中西合药组予口服清肺通络复方+顺尔宁。通过对三组患儿治疗前后人口学特征、中医单项证侯积分和实验室肺功能检测指标FEV1/FVC的比较，观察清肺通络法治疗儿童肺炎支原体肺炎临床疗效。通过测定三组患儿治疗前后的血清IFN-γ、IL-4以及IFN-γ/IL-4的变化，探讨清肺通络法的作用是否是通过对IL-4和IFN-γ细胞因子表达变化以及如何调控实现的。通过临床实验我们证实：对于中医辨证热郁肺络证的MPP缓解期干咳患儿，予以清肺通络法干预治疗，在总体临床疗效肯定，与单独应用孟鲁斯特钠咀嚼片相比，综合疗效相同；若同时使用清肺通络法配合孟鲁斯特钠咀嚼片，则疗效更佳。在改善MPP患儿咳嗽次数、咳嗽程度、咽痒或咽干、气急、伴见症状、舌象等方面，改善VC和FEV1等肺功能检测指标方面，三组疗效相当。在提高免疫细胞因子IFN-γ和IL-4方面，中药组和西药组疗效相当，但中西合药组的作用优于单独应用孟鲁斯特钠咀嚼片治疗。通过本研究，我们认为清肺通络法可通过调节Th1/Th2平衡，改善气道高反应，减轻气道慢性炎症。本课题共发表论文4篇，培养硕士研究生2名。