1型多聚ADP核糖合成酶在老年绝经后女性动脉粥样硬化发病过程中的作用和机制研究

老年绝经后女性动脉粥样硬化发生率和死亡率显著增高，其发病机制是氧化应激介导的细胞内多种基因/蛋白质异常表达为基础的，以炎症反应推动、血管壁脂质沉积为特征的，反复发生的血管壁的炎性损伤、修复和重塑过程。传统认为雌激素的缺乏在其中发挥了重要作用，但激素替代治疗并不能预防疾病的发生发展。1型多聚ADP核糖合成酶（PARP1）是一种对DNA断端敏感的核蛋白酶，申请者以往的研究表明PARP1能被氧化应激分子激活，通过调控多个转录因子的转录活性而调节相关基因的转录。最近完成的研究显示PARP1参与了多个动脉粥样硬化相关基因的表达调控。在此基础上，本课题拟通过动物模型和细胞模型深入研究PARP1通过调控包括雌激素受体在内多个转录因子的转录激活，在老年绝经后女性动脉粥样硬化发病过程中调控相关基因异常表达的关键作用和机制。所得结果将为老年绝经后女性动脉粥样硬化的预防和治疗提供新的靶点和实验依据。

本课题历时3年，所有工作按计划完成。.本项目通过动物模型构建、细胞实验等工作研究了1型多聚ADP核糖合成酶（PARP1）在老年绝经后妇女动脉粥样硬化发病中的作用和机制。研究证实了PARP1在老年女性动脉粥样硬化发生发展过程中的关键作用。我们的实验深入探讨了：1) PARP1与Smad3相互作用在血管紧张素Ⅱ刺激的大鼠血管平滑肌细胞中调控胶原蛋白、基质金属蛋白酶及其抑制物基因转录的机制。2）多聚ADP核糖化修饰抑制雌激素受体ERα的转录激活，调控血管平滑肌细胞中ERα相关靶基因的表达。3)PARP1 与法尼酯X受体a（FXRa）相互作用对HepG2 细胞中胆汁代谢相关基因转录的调控机制；4) ADP核糖化修饰可调节SP1介导的细胞周期。.本项目实施过程中共发表SCI文章4篇，其中包括5分以上文章一篇。本项目研究累计培养研究生8人，其中硕士在读5人，博士在读3人。我们在实验过程中运用了多种分子生物学实验技术和手段，包括PARP真核载体构建后蛋白纯化，PARP功能区域载体蛋白纯化等，为后续研究工作的开展搭建了先进的实验技术平台。