维生素K依赖蛋白Gas6在牙龈卟啉单胞菌脂多糖对内皮细胞生物学影响中的作用

Periodontitis is a common disease that affects individuals of different ages and is characterized by a chronic tissue-destructive inflammation. Invasion of endothelial cells is an important strategy developed by pathogenic bacteria to evade the host immune system or systemic spread of bacterial antigens. Present study by in vitro model is to investigate the effect of lipopolysaccharide(LPS) of Porphyromonas gingivalis(P. gingivalis) on the expression levels of growth-arrest-specific protein 6(Gas6) in endothelial cells, the effect of P. gingivalis LPS on the production of intercellular adhesion molecule-1(ICAM-1), E-selectin, interleukin-8(IL-8) and monocyte chemoattractant protein 1(MCP-1) in endothelial cells and the cell apoptosis induced by P. gingivalis LPS. In the same time, using the activation of Gas6 models or knocking down Gas6 models to observe the roles of Gas6 involving in these processes. It is suppose to confirm the relationship beween periodontitis and artherosclerosis. Evidence obtained from this study is supposed to approve the benefit of prevention and treatment of periodontitis for reducing the risk of cardiovascular diseases of human population.

牙周炎与动脉粥样硬化关联性现已明确，但其具体机制仍不清楚。维生素K依赖蛋白家族成员—生长抑制特异蛋白6（growth-arrest-specific protein 6, Gas6）参与了动脉粥样硬化斑块形成并在其中起到重要作用。本研究拟观察牙周炎致病菌牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，P. gingivalis）脂多糖对Gas6表达的影响，在此基础上通过对Gas6基因的敲低或过表达，探索Gas6在P. gingivalis脂多糖刺激内皮细胞表达粘附因子ICAM-1，E-selectin及趋化因子IL-8，MCP-1参与炎症的可能调控作用，及Gas6 在P. gingivalis脂多糖诱导的内皮细胞凋亡导致内皮功能损伤中的可能作用。研究旨在通过对相关机制的诠释，以期更好的理解牙周炎与内皮功能紊乱的关系，从而为探索牙周炎和动脉粥样硬化关联的潜在机制打下基础。

以动脉粥样硬化为主的心血管疾病具有较高的发病率和致死率，预防此类疾病有重大意义。牙周炎与动脉粥样硬化关联性现已明确，但其具体机制仍不清楚。维生素K依赖蛋白家族成员——生长抑制特异蛋白6(growth-arrest-specific protein 6, Gas6)参与了动脉粥样硬 化斑块形成并在其中起到重要作用。本研究观察牙周炎致病菌牙龈卟啉单胞菌脂多糖（P. gingivalis LPS）对Gas6及其配体表达的影响，在此基础上通过对Gas6基因的敲低或过表达，探索Gas6在P. gingivalis脂多糖刺激内皮细胞表达粘附因子ICAM-1，E-selectin及趋化因子IL-8，MCP-1参与炎症的可能调控作用。.本实验通过设置不同P. gingivalis LPS刺激梯度，证实了P. gingivalis LPS对HUVECs增殖无明显影响，但其增强了细胞的炎症反应，粘附因子ICAM-1，E-selectin及趋化因子IL-8，MCP-1表达上调，并抑制Gas6及其配体Axl表达。在Gas6沉默模型、过表达模型和非转染组中以 P. gingivalis LPS刺激HUVECs，3h后过表达Gas6组的粘附因子及趋化因子与对照组相比显著降低，24 h后，沉默组的粘附因子及趋化因子表达情况与对照组相比显著升高，过表达组的粘附因子及趋化因子与对照组相比显著降低。细胞划痕实验结果显示，敲低Gas6组细胞迁移能力与对照组相比增强，过表达组细胞迁移能力较对照组弱。.本研究表明Gas6在P. gingivalis LPS刺激下人脐静脉内皮细胞粘附分子及趋化因子表达中起抑制作用，提示其在牙周致病微生物致病物质引起的内皮细胞功能紊乱中可能起到一定的调节作用。本项目证实了Gas6在P. gingivalis LPS又到内皮细胞粘附、趋化等功能变化中起作用，通过后续实验相关机制的诠释将有助于更好理解牙周炎与内皮功能紊乱的关系，从而为探索牙周炎和动脉粥样硬化的关系打下基础。