α-actinin 4介导NHERF1调节细胞微丝骨架及其对肿瘤细胞黏附与迁移的影响

肿瘤的侵袭和转移取决于癌细胞的黏附和迁移能力，并与肿瘤细胞微丝系统的动态变化密切相关。微丝相关蛋白α-actinin 4对微丝系统的调节起着极其重要的作用，已知α-actinin 4的表达失控是肿瘤发生侵袭和转移的一个重要原因，然而目前有关α-actinin 4在细胞内表达调控的分子机制尚未建立。本课题前期初步发现NHERF1调节细胞骨架并下调α-actinin 4的表达。在此基础上，拟进一步采用多种方法从多个角度研究NHERF1与α-actinin 4在细胞内、外的相互作用；探索该相互作用影响α-actinin4表达的分子机制；并探索NHERF1是否经调节α-actinin 4表达、调节细胞的微丝系统而影响肿瘤细胞粘附与迁移。本研究不仅有助于阐明NHERF1在肿瘤侵袭和转移中的作用，而且可能揭示一种调节细胞微丝骨架变化的新机制，并为寻找新型肿瘤治疗药物的作用靶标提供理论依据。

肿瘤的侵袭和转移与癌细胞的黏附、迁移能力及细胞微丝的动态变化密切相关。微丝相关蛋白α-actinin 4表达失控是肿瘤发生侵袭和转移的一个重要原因，目前有关肿瘤细胞中α-actinin 4表达调控的分子机制尚不清晰。1）本课题组利用激光共聚焦和高内涵等方法首次发现并证实了NHERF1可抑制肿瘤细胞微丝骨架F-actin的组装，并下调骨架相关蛋白α-actinin 4的表达；2）采用GST Pull-down和免疫共沉淀的方法确认了NHERF1与α-actinin 4的相互作用，并进一步证实了α-actinin 4通过其羧基端与NHERF1的PDZ1结构域特异地相互作用，其羧基端最后4个氨基酸（ESDL）起主要作用；3）利用激光共聚焦显微镜观察到α-actinin 4与NHERF1在细胞中共定位。由此，我们推测NHERF1可以通过与骨架相关蛋白α-actinin 4直接的相互作用而调节了肿瘤细胞微丝骨架的组装。本研究不仅有助于阐明NHERF1调节α-actinin 4表达的机理，而且揭示了一种调节细胞微丝骨架变化的新机制，并为基于调控细胞微丝骨架治疗肿瘤的转移提供了可能的药物作用靶标和理论依据。