雄性小鼠肝螺杆菌(H.hepaticus)感染慢性进行性肝炎模型的建立及性别干预与疾病转归关系的探讨

在已经调查了我国不同实验动物中心H.hepaticus自然流行状况并已建立了H.hepaticus菌株的基础上，利用雄性A/J Cr小鼠对H.hepaticus特殊易感且易慢性化的特点，建立H.hepaticus诱导雄性小鼠慢性进行性感染性肝炎模型，然后于感染后不同时机（即早期、中期及后期）分别以手术去势、促性腺激素释放激素拮抗剂的"化学去势"、手术去势后再给予睾酮受体激动剂、以双氢睾酮最大限度地激动睾酮受体等多种方式分别进行性别干预。分析不同性别干预时机及方式对肝脏性别两态性基因、炎症相关性基因、肿瘤相关性基因以及性别两态性脂肪酸代谢功能的影响，并评价其与血清激素水平、性腺器官对性别干预的反应以及与肝组织慢性进行性炎症转归的关系。希望能为进一步揭示人类慢性病毒性肝炎在男性更易慢性化甚至更易进展为肝癌的机制以及究竟是否可以通过性别干预影响慢性进行性肝炎的转归提供研究依据。

慢性病毒性肝炎以及由肝炎所演变肝癌的发生率在男女之间存在明显的差异，但有关性激素与肝炎慢性化及肝癌发生发展的关系以及性激素干预治疗究竟有效与否等问题上，始终存在很大的分歧。而且近年来人们还发现肝脏是一个性别两态性器官，即肝脏在不同性别间的基因表达状况、线粒体功能、微粒体酶活性、膜脂成分以及在免疫反应中的作用都存在差异。其中，肝组织中编码细胞色素酶系（CYPs）的基因均以性别依赖方式进行转录。至于其在性别间的差异以及与疾病间的关系，目前的探讨还十分有限。本课题组在国家自然科学基金的资助下，于2010年起利用H.hepaticus不仅在雄性易感，而且还可诱导雄性小鼠发生肝脏炎症甚至肝癌的特点，探讨了性别干预对H.hepaticus感染雄性小鼠性别特异性基因表达的影响及其与肝脏病理组织学损伤的关系，而且在完成预定研究内容的基础上，还探讨了H.hepaticus根除的相关问题及其意义。.主要研究结果如下：（1）不同品系小鼠对H.hepaticus感染的易感性不同，除A/J Cr品系外，BALB/c Cr、SCID/ Cr小鼠感染H.hepaticus 3个月后相继出现以小叶性炎症为主的肝脏病理组织学改变，且随H.hepaticus感染时间延长肝脏炎症进行性加重；（2）H.hepaticus致病因子CDT在其诱导的慢性肝损伤中发挥主要致病作用；（3）在雄性小鼠幼龄期（感染后3个月）进行性别干预可明显阻止H.hepaticus感染诱导的肝脏炎症的发生和进展，并使肝脏雄性特异性基因的表达逐渐下调，雌性特异性相关基因的表达逐渐上调。而在成熟期（感染后6个月和9个月）进行性别干预则不能阻止肝脏炎症的发生和进展。此外还发现慢性乙肝患者血清H.hepaticus-IgG抗体阳性率明显高于健康体检者，且乙肝肝硬化患者随着Child-Pugh分级的增高其血清H.hepaticus-IgG抗体阳性率逐渐增加，慢性乙肝患者血清H.hepaticus-IgG抗体阳性率与患者年龄、性别及HBV DNA载量无明显相关性。.上述研究结果不仅进一步证实H.hepaticus可诱导易感品系小鼠出现肝脏炎症性改变，而且还表明对雄性小鼠幼龄期进行性别干预后，其肝脏炎症会随肝组织中性别基因表达水平的变化而发生变化。根除H.hepaticus有利于肝脏炎症性损伤的恢复。