PEDF34诱导内皮细胞凋亡的机制研究

色素上皮衍生因子PEDF通过抗血管新生抑制肿瘤生长，位于PEDF蛋白44-77位的34个氨基酸残基是PEDF发挥抗血管新生作用的功能表位。申请人研究表明PEDF34可通过诱导内皮细胞凋亡抑制肿瘤血管新生高效抑制前列腺癌生长，但PEDF34诱导内皮细胞凋亡的分子机制尚不明确。Fas/FasL途径是PEDF诱导血管内皮细胞凋亡的主要通路， PPARγ是新发现的调控FasL的转录因子；预实验表明PEDF34上调内皮细胞中FasL表达、促进caspase8切割。本项目拟明确PEDF34调控FasL的分子机制以及PEDF34是否通过MAPK-PPARγ-Fas/FasL /caspase8信号通路诱导内皮细胞凋亡。PEDF须同受体结合发挥功能，本项目拟进一步明确PEDF34诱导内皮细胞凋亡作用的受体。本项目旨在阐明PEDF34诱导内皮细胞凋亡作用的信号通路，为治疗前列腺癌提供新的候选药物和理论依据。

PEDF可以通过抗血管生成抑制肿瘤生长，然而，PEDF对前列腺癌的直接作用，功能性表位以及其作用从受体到转录因子的信号通路尚未完全阐明。本课题研究PEDF的功能片段PEDF34和PEDF44抑制肿瘤的作用和机制。结果表明，PEDF34在肿瘤组织和PC-3细胞通过激活死亡受体途径上调FasL和激活caspase- 8发挥作用。 FasL的RNA干扰或JNK 的抑制剂能够减弱PEDF34诱导的细胞凋亡作用。NF- κB和PPARγ是调控FasL表达至关重要的转录因子。 PEDF34上调PPARγ ，但并没有影响NF -kB的表达。siRNA-介导的PPARγRNA干扰或使用PPARγ抑制剂GW9662可以抑制PEDF34诱导的FasL上调，而NF-κB的RNA干扰或NF-κB的抑制剂PDTC是没有作用的。此外，激活JNK是PEDF34诱导上调FasL表达的必要条件。PEDF34比PEDF44对laminin受体有更强的亲和力和作用力。阻断laminin受体抑制PEDF34上调FasL和PPARγ。PEDF34诱导内皮细胞细胞凋亡和前列腺癌细胞的机制相同。本研究的结果表明， PEDF34 ，非PEDF44 ，是PEDF作为诱导凋亡的功能表位，通过激活死亡受体途径发挥促肿瘤细胞和血管内皮细胞凋亡的作用。 PEDF34的抗肿瘤细胞和抗血管生成的双重作用表明它可能是一种很有前景的前列腺癌的治疗药物。