预防肝吸虫病益生菌型鱼用疫苗的研制

通过对肝吸虫基因组研究，已获得1775条肝吸虫基因。经生物信息学及免疫学研究，我们从中筛选出多个有疫苗开发潜力的基因，包括在幼虫期和成虫期都表达的表膜蛋白、肌动蛋白和肌球蛋白、磷酸甘油酸激酶、谷胱甘肽转移酶等。将疫苗候选分子与枯草杆菌芽孢（益生菌）外壳基因cotc及其启动子融合（使用质粒pus186），转化枯草杆菌WB600，诱导芽孢形成。用特异性抗体进行流式细胞仪及免疫荧光检测，鉴定芽孢表面疫苗蛋白的表达，并使用SDS-DTT法提取芽孢外壳蛋白，进行免疫印迹鉴定。以饲料添加剂形式口服免疫麦穗鱼，检测鱼血清中IgM浓度，并用肝吸虫尾蚴攻击，对芽孢疫苗进行评价。旨在以益生菌枯草芽孢杆菌为载体，构建能在芽孢表面表达重组蛋白的工程菌，研制具益生功能的鱼用肝吸虫疫苗，在增产增收的同时，使鱼对肝吸虫尾蚴产生抵抗，减低或避免肝吸虫囊蚴形成，从中间宿主入手，切断传播途径，达到预防人体肝吸虫病的目的。