miR-675/miR-145反馈环路介导c-Myc促胃癌发生的新机制

microRNA与肿瘤发生密切相关；miRNA调控miRNA参与肿瘤发生未见报道。本课题组利用miRNA文库功能缺失性筛选发现了新促癌miR-675，并发现：胃癌细胞中miR-675上游受c-Myc调控；miR-675下游可能靶基因为PITX1，而PITX1在miR-145启动子区预测到多个转录结合位点，且其siRNA能下调miR-145，而miR-145又调控c-Myc。提示：miR-675可能抑制PITX1下调miR-145，进而上调c-Myc表达，而形成c-Myc促胃癌发生中miR-675/miR-145介导的正反馈环路。本项目拟检测miR-675与胃癌预后的关系；明确miR-675上游转录和对下游PITX1负调控及PITX1对miR-145的转录机制；重点研究miR-675和miR-145之间调控作用，以阐明miR-675/miR-145正反馈环路介导c-Myc促胃癌发生的新机制。

MicroRNA （miRNA）是一大类内源性非编码小RNA，通过转录后翻译抑制或靶mRNA裂解参与细胞增殖、分化、凋亡等生物学过程。人类基因组中已鉴定出超过1000个miRNA，呈现组织特异性表达。每个miRNA可以有多个靶基因，其本身的表达又受到不同机制调控，其中包括：转录因子结合、表观改变和染色体异常等。研究发现，miRNA与细胞的癌变有着极为密切的关系。最近的研究表明，miRNA在胃肠道恶性肿瘤中扮演致癌或抑癌基因的角色。对于miRNA表达调控的研究将是针对人类胃肠道恶性肿瘤化学性预防的一种新策略。.为深入阐释miRNA在胃癌发生过程中发挥的重要作用，揭示相关miRNA在胃粘膜细胞癌变中受到的转录调控和对基因表达的调控机制，我们利用miRNA阻遏物文库首次在胃癌细胞中以增殖表型为模型，进行了基于微电子传感器阻抗变化的胃癌增殖相关miRNA的高通量功能缺失性筛选，发现了12个能明显抑制胃癌细胞增殖的anti-miRNA分子。我们对miR-675进行了深入研究。分析发现， miR-675位于宿主非编码基因H19的第一个外显子中。截至目前，尚未见miR-675参与肿瘤发生发展的相关报道。.我们研究了miR-675参与胃癌细胞增殖的作用；探讨miR-675的上游转录机制和下游调控通路；明确miR-675的靶基因在胃癌中的表达和作用机制；探讨miR-145对miR-675的调控作用。结果发现： miR-675能明显促进胃癌细胞增殖；miR-675以PITX1为靶基因参与促胃癌信号通路的调控；PITX1在胃癌中发挥抑癌作用；miR-675受c-Myc的直接转录调控；miR-145通过负调控c-Myc间接调控miR-675的表达；miR675-miR145正反馈环路参与了c-Myc介导的促胃癌发生的作用。.总之，miR-675是新的促胃癌增殖相关miRNA，其上游受c-Myc直接转录调控，下游负调控PITX1，随后以p53依赖或非依赖方式调控miR-145；miR-145又通过负调控c-Myc间接调控miR-675的表达；由此在胃癌发生过程中形成一个由miR675-miR145正反馈环路介导的c-Myc促胃癌发生的调控新机制。