MicroRNA149降解AR促使雄激素非依赖前列腺癌细胞凋亡的基础研究

Androgen-independent prostate cancer(AIPC) is a major cause of death in advanced prostate cancer, and new therapeutic alternatives are needed to improve outcomes in patients with AIPC. Recent studies demonstrated that the androgen receptor (AR) plays an important role in proliferation of AIPC cells and progression of the disease therefore we are trying to explore the possible regulating factors of AR degradation in vivo and provide more preclinical information in vivo effects of regulating AR degradation factors and to perfect the "destruction of AR treatment" clinical ideas and provide valuable information. Preliminary studies have found close negative correlation between the expression of miR-149 and the transcriptional activity and protein expression of AR. In this project, we use microRNA lentiviral vectors to induce or silent expression of miR-149 in different AIPC cells in vitro to simulate the clinical castration treatment. Using these methods, we try to find out whether miR-149 could induce the AIPC cells apoptosis via AR degradation and provide a promising area of investigation for AIPC management.

雄激素非依赖性前列腺癌（AIPC）是晚期前列腺癌致死的主要原因，时至今日，尚缺乏有效的治疗措施和策略。最新的研究资料表明：雄激素受体（AR）在AIPC细胞的发生、增殖和进展过程中发挥重要的作用，因此，我们试图探索体内影响AR降解的调控因素，为完善"破坏AR治疗AIPC"的临床思路提供有价值的信息！前期工作已经发现miR-149表达与AR基因转录活性及蛋白表达之间呈现密切的负相关关系。本项目中，我们进一步利用microRNA慢病毒诱导和静默载体分别干预雄激素依赖程度不同的AIPC细胞中miR-149的表达，继而建立能够模拟临床去势治疗后体内生存环境的细胞培养体系，将被调控的AIPC细胞置于雄激素水平不同的两种培养体系中，分析总结miR-149能否通过降解AR达到诱导AIPC细胞凋亡并遏制其恶性潜能的目的，揭示AR降解的诱导机制，为寻找新的AIPC治疗靶点奠定理论基础！

前列腺癌起病多无症状，不少人发现时已是晚期。雄激素阻断为核心的内分泌治疗是针对晚期前列腺癌公认的有效方法，但在经过2年左右的缓解期后雄激素依赖的前列腺癌会转变为雄激素非依赖前列腺癌，肿瘤复发。本课题重点探究前列腺癌细胞的这一转化机制。本实验通过无雄激素环境体外培养前列腺癌细胞，诱导其由雄激素依赖转化为雄激素抵抗，进而检测其miRNA与AR的变化，探索二者与前列腺癌细胞产生激素抵抗的关系。实验过程中，发现c-Met与前列腺癌细胞激素抵抗亦存在相关联系。通过质粒将c-Met基因转染LNCaP细胞，证实c-Met能够促进前列腺癌细胞上皮间质转化（EMT），细胞由上皮细胞表型转变为间质细胞表型。进一步探究EMT机制，发现缺氧诱导因子-1α亦有调节作用，在缺氧环境下，同样促进前列腺癌细胞发生表型改变。本实验的一个重点是诱导雄激素依赖的LNCaP细胞转化为雄激素抵抗的LNCaP-A1细胞，此过程进展的并无预期中的顺利，总结分析了若干原因，有待进一步探究。