BAFF受体及其特异性受体拮抗剂对ITP自身免疫抑制作用的细胞和分子机制研究

BAFF通过与其受体（BCMA、TACI和BAFF-R）结合，调节B细胞的增殖、活化及抗体分泌。BCMA能延长骨髓浆细胞的寿命，而TACI被认为有负性调节作用，BAFF-R对B细胞的发育、分化、抗调亡有着重要作用。BAFF及其受体表达异常，可引起B细胞增殖、活化、抗体分泌的紊乱，引发自身免疫性疾病。最近的研究已证实，在ITP患者，血清BAFF水平明显升高，BAFF通过抑制淋巴细胞凋亡、促进干扰素分泌参与了ITP的病理学过程。为了进一步了解BAFF系统在ITP发病中的作用，我们应用免疫荧光共聚焦技术及流式细胞术检测患者脾脏、外周血及骨髓单个核细胞BAFF受体的表达情况。并在体外培养和动物试验中分别检测抗BCMA抗体、抗TACI抗体和抗BAFF-R抗体对B细胞增殖活化，抗体产生及T细胞的影响。进一步丰富BAFF系统在ITP发病中的机制，为选择高效、低毒的BAFF阻断剂治疗ITP提供理伦依据。

在我们的实验中，我们检测了外周血、骨髓及脾脏细胞内BAFF受体：BAFF-R、TACI、BCMA的表达，发现，在ITP 患者的外周血CD19+B细胞及CD4+T细胞表面BAFF-R明显减少，而在患者的骨髓单个核细胞表面，只有成熟B细胞表面BCMA的表达明显增多，余表达未见异常，在患者的脾脏内，BAFF-R的表达明显增多，且与表达IgM的细胞重叠。说明在ITP患者，存在BAFF受体表达的异常。在体外实验中，我们发现：1.在ITP患者，BAFF主要通过与BAFF-R的结合抑制了CD19+B细胞及CD8+T细胞的凋亡，而在正常对照，BAFF仅仅抑制了CD19+B细胞的凋亡，并且可能需要2种或3种受体的共同参与；2. 在ITP患者，BAFF主要通过与BAFF-R的结合促进了CD19+B细胞及CD8+T细胞的增殖，通过与TACI的结合促进了CD4+T细胞及CD8+T细胞的增殖，而在正常对照，仅通过与TACI的结合促进了CD8+T细胞的增殖；3.进一步研究发现，在ITP, BAFF与BAFF-R结合促进了细胞内抗凋亡基因BCL-2及MCL-1的表达，而在正常对照，其抗凋亡基因的表达未发现异常，BAFF与BAFF-R结合还促进了γ-IFN的分泌，与TACI结合促进了IL-4及IL-6的分泌，以上结果显示，BAFF及BAFF受体系统参与了ITP的发病异常，其中BAFF-R主要是通过促进了细胞内抗凋亡基因BCL-2及MCL-1的表达抑制B细胞及T细胞凋亡，并促进γ-IFN分泌，TACI在ITP中是一个重要的阳性刺激受体，主要影响了ITP患者T细胞的增殖及IL-4和IL-6的分泌。在动物实验中，我们发现，ITP小鼠与人类ITP 明显不同，在ITP小鼠，其B细胞上BAFF-R表达明显升高，而另外两种受体BCMA与TACI在ITP小鼠和对照组小鼠中表达无明显差异，给予BAFF-R Fc融合蛋白可抑制ITP小鼠B细胞的存活和病情。