APRIL介导的ITP自身免疫及双向免疫调控机制

Our previous studies suggested that APRIL may play a role in autoimmune mechanisms of ITP. Both of platelets and megakaryocytes possibly reverse regulate autoimmune of ITP through APRIL. But it remains unclear for the specific mechanism and the role played by APRIL. Therefore, we hope to clarify whether APRIL of T, B lymphocytes and DC participate in autoimmune mechanism of ITP through this study. And to clarify whether APRIL of platelets plays reverse regulation to the autoimmune in ITP. We will research the roles of APRIL on platelet surface involved autoimmune ITP through silence and overexpression of platelet surface APRIL. Furthermore, we will clarify different APRIL signaling pathways for autoimmunity and its mechanism of ITP by blocking two major receptors BCMA, TACI. Finally, we will confirmed the results in vivo experiments by a new proactive ITP mouse model. This study will clarify whether and how APRIL mediated autoimmune and immune-way control mechanism of ITP. This study will elucidate the mechanisms of platelets and megakaryocytes reverse control autoimmune of ITP and provide a theoretical basis for development of new treatments.

我们前期研究提示APRIL可能在ITP的自身免疫机制中发挥作用，且血小板和巨核细胞可能通过APRIL对ITP的自身免疫紊乱存在反向的调控作用。但是具体的机制及APRIL发挥的作用尚不明确。因此我们拟通过本研究明确APRIL是否参与ITP的自身免疫机制，并从ITP自身免疫靶标血小板反向调控的角度阐述APRIL对ITP自身免疫的影响；通过沉默和过表达血小板表面APRIL，从正反两方面明确APRIL是否参与了血小板本身对ITP自身免疫的影响，进而通过对介导APRIL信号的两个主要受体BCMA、TACI的阻断，进一步明确不同的APRIL的信号传导通路对ITP自身免疫的影响及其机制；随后通过新的主动型ITP小鼠模型在体内实验中进一步证实。本研究将明确APRIL能否以及如何介导的ITP自身免疫及双向免疫调控机制，阐明血小板和巨核细胞对ITP的自身免疫紊乱反向调控机制，并为发展新的治疗措施提供理论基础。

根据研究计划，本课题将明确APRIL是否以及如何介导血小板对ITP的自身免疫发挥反向调控作用的机制，通过不同的诱饵受体阻断，明确不同的信号传导通路所介导的APRIL信号对ITP自身免疫的作用及其机制。课题组首先研究了ITP患者不同免疫细胞如T、B、DC、单核细胞，及靶细胞巨核细胞和血小板表面APRIL的表达情况，结果发现T、B、DC、单核细胞表面并不表达APRIL，与某些文献报道不一致，而巨核细胞和血小板表面APRIL的表达量明显降低，这与我们的猜想正好相反，该结果被2019年国际血栓与止血大会接受为Poster。随后我们又检测发现ITP患者血浆中可溶性APRIL的含量明显增高。血小板表面膜结合型的APRIL和血浆中可溶性APRIL的异常表达提示APRIL参与了ITP的发病机制。进一步分析发现APRIL的表达量和血小板的计数是呈正相关的。因此我们又检测了患者治疗前后APRIL的表达量的变化，结果发现治疗完全缓解的患者治疗后APRIL的表达量是明显升高的，而治疗无效患者治疗前后是没有明显变化的，提示APRIL的表达量可能是一种潜在的疗效预测因素。我们进一步探索了APRIL在ITP中如何发挥免疫调节作用的机制。我们研究发现ITP患者Bregs含量明显降低，为了明确两者之间的关系，通过加入外源性APRIL刺激外周单个核细胞，发现APRIL刺激B细胞产生了更多的IL-10，而加入APRIL抑制剂后这种现象明显被抑制。随后我们用APRIL的同源异构体BAFF刺激，结果发现APRIL比BAFF刺激产生更多的IL-10。我们的结果显示APRIL是抑制ITP免疫反应的介质，APRIL的在ITP中的免疫调节作用可能至少部分归因于产生IL-10的B细胞。通过本课题的资助，发表文章5篇（其中SCI论文2篇，国内核心期刊论文3篇）；会议论文8篇（其中国内会议发言5次，国际会议壁报交流3次）。