fgl2凝血酶原酶介导非酒精性脂肪性肝炎（NASH）肝脏炎性损伤的机制及干预策略研究

The pathogenesis of NASH is complex, and there is no ideal treatment for NASH. Macrophage plays a key role in the pathogenesis of NASH. Our previous studies have found that the level of fgl2 expressed by activated macrophages increased significantly in NASH, and is closely related with liver inflammatory injury. But the exact role and mechanism of fgl2 in NASH are still unclear. In this study, we explore the role of fgl2 in a MCD-diet induced NASH mice model by using fgl2 knockout, fgl2 plasmid intervention. Secondly, a macrophage NASH model is established by free fatty acid stimulation, gene silence or overexpression is applied to identify the effect of fgl2 on the function and activation of macrophage.Thirdly, inhibitors of different regulatory factors in MAPK and NF-kB signaling pathways are used to clarify the regulatory mechanisms for fgl2 transcription. Finally, miRNA interference and fgl2 blocking antibody are used to explore the new treatment strategy for NASH.

NASH发病机制复杂，临床尚无理想治疗方法。以巨噬细胞为核心的炎性损伤是NASH发病机制中的重要环节。我们前期研究发现NASH发生时肝脏内活化巨噬细胞表达的fgl2凝血酶原酶水平显著增高，且与肝脏炎性损伤密切相关。但fgl2究竟如何发挥作用，其分子调控机制如何尚不清楚。为明确上述科学问题，本研究首先建立MCD饮食诱导的NASH小鼠模型，通过fgl2基因敲除、表达质粒干预等方法，明确fgl2在NASH炎症损伤过程中发挥的具体作用及调控机制；其次建立游离脂肪酸刺激的小鼠巨噬细胞NASH模型，通过fgl2基因沉默或过表达等方法进行干预，探讨fgl2对巨噬细胞功能及活化的影响；其后应用MAPK及NF-kB信号通路中不同调节因子的抑制剂进行干预，阐明调控fgl2转录活化的确切作用靶点；最后，采用miRNA干扰，fgl2抗体阻断等方法对NASH小鼠进行干预，探索NASH治疗的新策略。

NASH在全球的发病率显著上升，其发病机制复杂，临床尚无理想治疗方法。以巨噬细胞为核心的炎性损伤是NASH发病机制中的重要环节。本研究建立了MCD饮食诱导的NASH小鼠模型，通过fgl2基因敲除、表达质粒干预等方法，明确了fgl2在NASH炎症损伤过程中发挥的具体作用及调控机制；建立游离脂肪酸刺激的小鼠巨噬细胞NASH模型，通过fgl2基因沉默等方法进行干预，探讨fgl2对巨噬细胞功能及活化的影响；应用MAPK及NF-kB信号通路中不同调节因子的抑制剂进行干预，阐明调控fgl2转录活化的确切作用靶点。我们发现在NASH小鼠模型肝脏中fgl2的表达明显升高，且与肝脏巨噬细胞浸润增多有关。与WT小鼠NASH模型相比，fgl2敲除鼠炎性肝损伤和脂肪变性明显减轻。在NASH模型的肝组织和骨髓来源的巨噬细胞中，fgl2缺失导致促炎细胞因子TNF-a、IL-1b、MCP-1、IL-6分泌减少。同时，NF-kB和p38-MAPK信号通路的激活以及NLRP3炎性小体的表达均显著降低。在fgl2敲除鼠中，脂质生成相关基因(SREBP-1c, HMGCR)表达下调，而脂质代谢相关基因(PPARa, PGC-1a)表达上调。本研究揭示了Fgl2通过多种信号通路增强巨噬细胞的炎症活性从而促进NASH炎症和脂肪变性，该发现为寻找NASH的临床治疗新靶点提供了依据。